產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3707 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
雞痘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Fowlpox Virus(FPV)PCR | BKP3707 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
HA細胞,人羊膜細胞 產(chǎn)氣腸桿菌 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS3葡萄糖脫氫酶5克
IL8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL-8 / CXCL8 蛋白7-羌基香豆速 7-xy7noxycoumcrin 93-32-6
NCI-H1650(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) GENEPAGEPLUS8%EZSQZ.*CLDPAK*8% GENE-PAGE PLUS, 擠壓式瓶裝生物技術(shù)級5X75MLCOLD
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-1D32′-脫氧胞苷鹽酸100克
RNASET2 Others Human 人 RNASET2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (多聚半乳糖醛酸鈉)
小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32十二烷基苯磺酸鈉(>95%,Tech Grade) dodecylbenzenesulfonate質(zhì)量規(guī)格:>95%,Tech Grade
XCL1 Others Cynomolgus 食蟹猴 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 硅酸鈉九水(>98%,BR) silicate hydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CM-M041小鼠肝星形細胞完全培養(yǎng)基100mL5-溴-3-吲哚基-β-D-吡喃半乳糖苷(>98%,BR)Bluo-Gal質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
U-2 OS, 人細胞 神經(jīng)母細胞瘤細胞,LAN-6細胞 COS-7(SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞)1酸氫二鈉二水Di hydrogen phosphate dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swiss albino中性蛋白酶Neutral Protease from Bacillus polymyxa質(zhì)量規(guī)格:酶活:20萬u/g
雞痘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)腦微內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)硫酸鈰八水(>97%,BR)Cerium(III) sulfate, octahydrate質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
FCGR1 Others Mouse 小鼠 CD64 / FCGR1 人細胞裂解液 (陽性對照) Bz-2'-脫氧胞苷亞1酰胺單體Bz-dC Phosphoramidite質(zhì)量規(guī)格:>98%
HSC-T6 大鼠肝星形細胞匹多莫德Pidotimod質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
犬腎細胞;MDCK/IgR匹多莫德(標(biāo)準(zhǔn)品)Pidotimod質(zhì)量規(guī)格:含量測定
5637, 人細胞硫酸羥基氯喹Hydroxychloroquine Sulfate質(zhì)量規(guī)格:>98%
盤羊皮膚細胞;OAM-S13-羥基地氯雷他定質(zhì)量規(guī)格:美國進口3-Hydroxy Desloratadine
DLD-1細胞,人結(jié)直腸腺癌上皮細胞 人視網(wǎng)膜母細胞瘤,Y79細胞 人導(dǎo)管癌細胞;ZR-75-30地氯雷他定-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進口Desloratadine-d4
HK-2(人腎小管上皮細胞) 5×106cells/瓶×23-羥基地氯雷他定β-D-葡萄糖醛酸苷質(zhì)量規(guī)格:美國進口3-Hydroxy Desloratadine β-D-Glucuronide
ACVR2B Others Human 人 ACVR2B / ActivinR-IIB 人細胞裂解液 (陽性對照) 奧司他韋酸-d3 質(zhì)量規(guī)格:美國進口Oseltamivir-d3 Acid
人真皮成纖維細胞-新生兒cDNAHDF-n cDNA6-氯咪唑并[1,2-b]噠嗪質(zhì)量規(guī)格:>98%6-Chloroimidazo[1,2-b]pyridazine
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:雞痘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。