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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3706 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
禽痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | Fowl Pox Virus（FPV）PCR | BKP3706 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：禽痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
WI-38人胚肺細(xì)胞 WI-38 in human embryo lung cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS磺胺100克
MSTN Protein Mouse 重組小鼠 GDF-8 / Myostatin / MSTN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)6-羌基多巴安輕溴醋鹽 95% 6-xy7noXYDOPcMINq xy7noBROMIDq 636-00-0
人成纖維細(xì)胞(HPrF)(5×105) 人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 HumanA.C.E.BUFFER1X,TINTEDA.C.E. 測(cè)序緩沖液 (1X 帶顏色)測(cè)序級(jí)1LRT
tTA基因修飾的小鼠細(xì)胞(B類(lèi));Pan02-CAG-tTA-3E6MITOCHONDRIALPROTEINISOLATIONBUFFER線(xiàn)粒體蛋白分離緩沖液蛋白組學(xué)級(jí)30mlCOLD
人腦膜細(xì)胞 (HMC)( 5×105 )5625-37-6-N,N'-二(2-乙磺酸)pipes
小鼠T細(xì)胞瘤細(xì)胞;Cyc-Tag(S49)司帕沙星Sparfloxacin質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
CD40 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 司帕沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）Sparfloxacin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
U251人細(xì)胞 Human glioma cell line U251 DMEM+10% FBS氟喹酮Afloqualone質(zhì)量規(guī)格：>98%
U251細(xì)胞，人神經(jīng)細(xì)胞 滑假絲酵母 人海馬趾神經(jīng)元RNAHN-h miRNA5 μg氟喹酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Afloqualone質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
RT4(人膀胱移行細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2磺胺醋酰鈉 SA-NASufacetamide 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
禽痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)內(nèi)臟脂肪細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)脫氫吲達(dá)帕胺Dehydro Indapamide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) CHPS-Na；3-氯-2-羥基丙磺酸鈉CHPS-Na質(zhì)量規(guī)格：>98.5%
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLSBES；2-溴乙基磺酸鈉 2-bromoethanesulphonate質(zhì)量規(guī)格：>98.5%
293-L.P.人胚腎細(xì)胞 Human embryonic kidney cell line 293-L.P. MEM+10% FBSBICINE；N,N-二羥乙基甘氨酸BICINE質(zhì)量規(guī)格：>99%
IFNG Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白BES salt; N,N-二(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸鈉BES Salt質(zhì)量規(guī)格：>99%
人羊膜細(xì)胞;WISH4-十八烷氧基苯(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC)4-Octadecyloxybenzaldehyde
LSAMP Others Human 人 LSAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-丙氧基苯(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)4-Propoxybenzaldehyde
HCT 116 人細(xì)胞4'-丁基苯乙酮(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC)4'-Butylacetophenone
OS-RC-2人細(xì)胞 Human renal cell carcinoma OS-RC-2 cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4'-丁氧基苯乙酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)4'-Butoxyacetophenone
TNFSF13B Protein Human 重組人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白4-酮基9-順式-甲酯視黃酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口4-Keto 9-cis Retinoic Acid Methyl Ester
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
