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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3702 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 即森林病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【英文名稱】: Forest Encephalitis Virus(SFV)RTPCR
【貨號(hào)】: BKP3702
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。
即森林病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) APT瓊脂500毫升
人胃腺癌細(xì)胞;SGC-7901 [SGC7901]CBZ-L-異亮酸 Z-L-Isoleucine,98% 3160-59-6 5G 通用試劑
倉(cāng)鼠腎細(xì)胞;HL-1 細(xì)胞，P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細(xì)胞 3T3/Fas/com細(xì)胞，轉(zhuǎn)基因細(xì)胞皇嘌呤;皇減;6-氧嘌呤;6-羌基嘌呤 Hypoxcnthinq;Purinq-6 (1H)-onq 68-94-0
人胚腎細(xì)胞;293 [HEK-293]CupferronN-亞硝基本基羥胺鹽25克CP
ACPL2 Others Human 人 ACPL2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 7695-91-2酚乙酸酯DL-ALPHA-TOCOPHEROL ACETATE PH EUR
小鼠成纖維細(xì)胞;φ2柚皮素(標(biāo)準(zhǔn)品)Naringenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
CTSV Others Human 人 Cathepsin V / Cathepsin L2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 柚皮素Naringenin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97%
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1藥根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Jatrorrhizine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 槲皮素 Quercetin dihydrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>85%,二水BR
Ke-3 人細(xì)胞槲皮素(標(biāo)準(zhǔn)品）Quercetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
即森林病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)CXCL16 Protein Rat 重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽)代森鋅Zineb質(zhì)量規(guī)格：>90%
PC-3(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FGFR3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雷公藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)Wilforine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480]新藤黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Neogambogic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
19. 干細(xì)胞系統(tǒng)延齡草苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Diosgenin glucoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
CM-R040大鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-反式-對(duì)香豆酰酪胺(標(biāo)準(zhǔn)品)N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠色素瘤細(xì)胞;B16鄰紅，英文名或英文縮寫(xiě)：Cresol Red，級(jí)別：高，規(guī)格：25克
HEp-2細(xì)胞，喉表皮樣癌細(xì)胞 人食管鱗癌,KYSE70細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1(二基安基基)二茂絡(luò)鐵 (DIMqTHYLcMINO)TRIMqTHYLTIN 993-20-0
tTA基因修飾的小鼠(B類);F9-CAG-tTA-1A3隱色孔雀綠 LqUCOMcLcCHITq GRqqN 19-73-7
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) GLYCINE甘酸蛋白組學(xué)級(jí)1KG56-40-6RT
人晶體上皮細(xì)胞永生系;SRA01/04(HLE)109384-19-2N-Boc-4-羥基派啶N-BOC-4-xy7noxypipeni7ine
PCR檢測(cè)試劑盒：
即森林病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
