產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3686 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
貓毒PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產品。
【產品名稱】: 貓毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Feline Leukemia Virus(FeLV)PCR
【貨號】: BKP3686
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
貓毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
12. 骨骼細胞系統支原體肉湯培養(yǎng)基100張/盒
CL-0107HGC-27(人細胞)5×106cells/瓶×2酮康唑 Ketoconazole,98% 65277-42-1 25G 通用試劑
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-Swiss albino 大鼠角膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL流醋羌基錄喹 xy7noxychloroinoneq Sulfctq 747-36-4
K562/Adr 人阿霉素耐藥株牛血纖維蛋白原shēng huà shì jì容量:RT25克
IL10 Others Human 人 IL10 / Ierleukin-10 人細胞裂解液 (陽性對照) 122-99-62-本氧乙醇2-pxenoxyethanol
小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3特非那定Terfenadine質量規(guī)格:>98%,BR
CD14 Others Mouse 小鼠 CD14 人細胞裂解液 (陽性對照) 維生素C鈉(標準品) ascorbate質量規(guī)格:含量測定
小鼠細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]硝酸硫胺(標準品)Thiamine nitrate質量規(guī)格:含量測定
CX3CL1 Others Canine 狗 Fractalkine / CX3CL1 人細胞裂解液 (陽性對照) α-細辛腦,細辛(標準品)alpha-Asarone質量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
PC-12(高分化),PC12,大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株(高分化)鹽酸二氧丙嗪(標準品)Dioxopromethazine hydrochloride質量規(guī)格:鑒別
A-498(人細胞) 5×106cells/瓶×2薯蕷皂素Diosgenin質量規(guī)格:>95%,BR
HNEpC-c 人鼻粘膜上皮細胞(HNEpC) 500,000cells 成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-半胱氨酸鹽酸鹽一水D-Cysteine hydrochloride monohydrate質量規(guī)格:度大于98%,BR,一水物
膀胱上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鈣蛋白酶抑制劑II(進口)Calpain Inhibitor II(ALLM)質量規(guī)格:≥95%,美國進口
LTA4H Others Mouse 小鼠 Leukoiene A4 Hydrolase / LTA4H 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 炔孕酮/素(標準品)Ethisterone質量規(guī)格:>98%,標準品
人癌細胞;MDA-MB-453炔孕酮/素Ethisterone質量規(guī)格:>98%
貓毒PCR檢測試劑盒說明書EFNA4 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽)3,3'-二硝基二苯甲酮(>99.0%(GC))質量規(guī)格:>99.0%(GC)3,3'-Dinitrobenzophenone
BE(2)-M17(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纖維細胞;PA3172,4'-二氟二苯甲酮(>95.0%(GC))質量規(guī)格:>95.0%(GC)2,4'-Difluorobenzophenone
人成纖維細胞HCF4,4'-二氟二苯甲酮(>99.0%(GC))質量規(guī)格:>99.0%(GC)4,4'-Difluorobenzophenone
IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4-二芐氧基苯(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)1,4-Dibenzoylbenzene
大鼠腸內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL3,3',4,4'-二苯基砜四羧酸二1(>97.0%(HPLC)(T))質量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)3,3',4,4'-Diphenylsulfonetetracarboxylic Dianhydride
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。