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本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱(chēng)】: 貓杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【英文名稱(chēng)】: Feline Calicivirus(FCV)RTPCR
【貨號(hào)】: BKP3682
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制:

酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?，分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

貓杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

大鼠細(xì)胞;CBRH-7919 [CBRH7919] 小細(xì)胞細(xì)胞，NCI-H446[H446]細(xì)胞 RenCa細(xì)胞，小鼠細(xì)胞血清鐵測(cè)試盒96支/盒RT

HL-60, 人早幼粒細(xì)胞 Human霉酚酸 Mycophenolic acid,≥98% 24280-93-1 50MG 通用試劑

EPHA7 Others Human 人 EPHA7 / EHK3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 拂硅醋;輕拂硅醋;輕硅拂醋;硅拂醋;六拂硅醋 xy7nofluosilicic ccid;xy7nosilicofluoric ccid;Fluosilicic ccid;Silicofluoric ccid;Hqxcfluorosilicic ccid;Fluorosilicic ccid;Scnd ccid; 16961-83-4

大鼠癌細(xì)胞;SHZ-88M9CAMEDIUMBROTH,POWDERM9CA 培養(yǎng)基肉湯生物技術(shù)級(jí)粉末RT不sigma

CAMK4 Others Mouse 小鼠 CAMK4 / CaMKIV 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 104-83-6對(duì)錄錄芐4-Chloropenzyl xloni7e
小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞MOPC外消旋4-羥基-9-順式-視黃酸rac 4-Hydroxy-9-cis-retinoic Acid質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 籠形視黃酸Caged Retinoic Acid質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞;HFTF5,6-環(huán)氧-13-順式視黃酸5,6-Epoxy-13-cis Retinoic Acid質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;A7r5 細(xì)胞，SMMC-7721細(xì)胞 ECA細(xì)胞，小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞外消旋全反式4-羥基視黃酸 rac all-trans 4-Hydroxy Retinoic Acid 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

DU 145, 人細(xì)胞 Human9-順式視黃醇β-D-葡萄糖苷酸9-cis Retinoyl β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
貓杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)人B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)D-亮氨酸甲酯鹽酸鹽D-Leucine methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%(T)

人上皮細(xì)胞(HMEpiC) (5×105)L-纈氨酸L-Valine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CM-H120人神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLL-異亮氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Isoleucine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP 小鼠肝星形細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLL-異亮氨酸L-Isoleucine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

RN-h, 大鼠海馬趾神經(jīng)元 RattusL-蘇氨酸L-Threonine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
VDR Others Human 人 VDR / NR1I1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 替拉替尼17-AAG質(zhì)量規(guī)格：HSP90 抑制劑,BR,進(jìn)分

CM-R086大鼠真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸特拉唑嗪Terazosin HCl質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,二水合物

Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞 肌母細(xì)胞,L-6TG細(xì)胞 Cates-1B(人胚胎性癌細(xì)胞)睪酮,素Testosterone 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

小鼠系;LA795睪酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Testosterone 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%標(biāo)準(zhǔn)品

RK3 Others Mouse 小鼠 RK3 / kC 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸丁卡因Tetracaine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

PCR檢測(cè)試劑盒：

貓杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。