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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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大片吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP3678
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-10
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP3678
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

大片吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)

Fasciola giganticaPCR

BKP3678

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min。
3
:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測(cè)或-20長(zhǎng)期保存。
4
PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:大片吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   
實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
MRC-5人胚肺細(xì)胞 MRC-5 in human embryo lung cells MEM+10% FBSROSANILINECHLORIDE堿性品紅(中文名稱對(duì)嗎)*綠色閃光粉末RTsigma

INHBA Protein Mouse 重組小鼠 Inhibin beta A / INHBA / Activin A 蛋白 (His 標(biāo)簽)扁桃酸 Mandelic acid,99% 90-64-2 100G 通用試劑

人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞(HBdSF)(5×105) 人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞 Human錄化血紅速;錄高鐵血紅速;血晶;言醋血紅速 HqMin;HqMctinq xy7nochloridq;HqMin chloridq;Chloroprotoporphyrin IX iron(III);1,3,5,8-TqtrcMqthy1-2,4-divinylporphinq-6,7-dipropionic ccid fqrrichloridq;ChlorohqMin;Chlorofqrriprotoporphyrin;FqrrihqMq chloridq;Fqrriporphyr in chloridq 16009-13-2

大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6N-Hexadecane正十六烷*無(wú)色液體RTsigma

AFP Others Human AFP / alpha-fetoprotein 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 110-40-7癸二酸二乙酯;皮脂酸乙酯Dietxyl Sebacate;Decanedioic acid dietxyl ester
小鼠心肌細(xì)胞MCM外消旋心得安-d7rac Propranolol-d7質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

EFNA5 Others Canine Ephrin-A5 / EFNA5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5-羥基鹽酸心得安5-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

人胚胎肌肉組織來(lái)源細(xì)胞;CCC-HSM-2(R)-4-羥基鹽酸心得安(R)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

NCI-H446細(xì)胞,人小細(xì)胞細(xì)胞 大鼠神經(jīng)細(xì)胞,C6細(xì)胞 CM-H111人成骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL(S)-4-羥基鹽酸心得安(S)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

P815(小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(+/-)-4-羥基鹽酸心得安(+/-)-4-Hydroxy Propranolol Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
大片吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)人表皮色素細(xì)胞-HEM-a吉非羅齊1-O-β-葡萄糖苷酸-d6Gemfibrozil 1-O-β-Glucuronide-d6質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

DAPK1 Others Human DAPK1 / DAP Kinase 1 (aa 1-363) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-去甲基昂丹司瓊N-Demethyl Ondansetron質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

兔角膜后基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCBBF6-羥基昂丹司瓊6-Hydroxy Ondansetron質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

Y1細(xì)胞,腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 人細(xì)胞,MIApaca-2細(xì)胞 CM-M008小鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL8-羥基昂丹司瓊8-Hydroxy Ondansetron質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口

大鼠細(xì)胞;UMR-106奧昔康唑Oxiconazole質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
QSG-7701
細(xì)胞,人胚肝細(xì)胞正常 APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株,7WPS1細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆); EPO-CHO-T7-酮基去氫表雄酮質(zhì)量規(guī)格:>98%7-Keto-dehydroepiandrosterone

LLC-MK2(恒河猴腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硝酸銣質(zhì)量規(guī)格:>99%Rubidium nitrate

Promocell Drosophila Schneider's Drosophila Medium果蠅培養(yǎng)基,無(wú)L-谷氨酰胺 500mlCHIR-99021 (CT99021.HCl)質(zhì)量規(guī)格:>99%,GSK-3α/β抑制劑CHIR-99021 (CT99021) HCl

人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總RNAHASMC NA駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Harmaline;Dihydroharmine

CFD Others Mouse 小鼠 CFD / Adipsin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) JNJ-26854165 (Serdemetan)質(zhì)量規(guī)格:>98%JNJ 26854165


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