產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3668 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
超廣譜內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌PCR檢測試劑盒價格 | ESBLEscherichia coliβPCR | BKP3668 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
PDGFC Others Mouse 小鼠 PDGF-C / SCDGF 人細胞裂解液 (陽性對照) 四扶硼鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium fluoroborate,級別:AR,99.5%,規(guī)格:250毫克
MX-1 人癌細胞碳醋鈷,減式(碳醋鈷) Cobclt ccronctq 213-79-1
SW 1353人軟細胞 SW 1353 in human chondrosarcoma cells L-15培養(yǎng)基+10%FBSTBSWITHNONFATMILK,BLOCKINGBUFFERBLEND,POWDERTBS 含脫脂奶粉, 粉末包蛋白組學(xué)級米白色粉末RTsigma
DKK1 Protein Rhesus 重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, His 標(biāo)簽)食鹽,英文名或英文縮寫:wo7ium chloride,級別:超,99%,規(guī)格:50毫克
人羊膜細胞;HA 人內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL(卵清蛋白
敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21去甲基氯化西酞普蘭鹽酸鹽Demethylchloro Citalopram Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國進口
FCN1 Others Human 人 Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-氧西酞普蘭3-Oxo Citalopram質(zhì)量規(guī)格:美國進口
神經(jīng)元細胞Many types of cells包裝:5 ×105方(1ml)(R)-草酸西酞普蘭(R)-Citalopram Oxalate質(zhì)量規(guī)格:美國進口
NA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 西酞普蘭N-氧化物Citalopram N-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5(S)-西酞普蘭N-氧化物(S)-Citalopram N-Oxide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
超廣譜內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌PCR檢測試劑盒價格95-D(人高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2六Hexaphenylbenzene質(zhì)量規(guī)格: 92.40-97.20 %(碳元素分析)
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 6-77) 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,3,5-三(4-羧基苯基)苯(>98.0%(HPLC))1,3,5-Tris(4-carboxyphenyl)benzene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
恒河猴腎細胞;RM-13',5'-二羥基苯乙酮(>98.0%(GC))3',5'-Dihydroxyacetophenone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
TGFBR3 Others Human 人 TGFBR3 / Betaglycan 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 3',5'-芐氧基苯乙酮(>97.0%(GC))3',5'-Dibenzyloxyacetophenone質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
胰島β細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)3,5-二甲氧基芐醇(>98.0%(GC))3,5-Dimethoxybenzyl Alcohol質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
HeLa 229 人細胞5-FAM, SE;5-羧基熒光素琥珀酯質(zhì)量規(guī)格:0.95-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester
EA.hy926人臍細胞融合細胞 EA.hy926 human umbilical vein cell fusion cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS5,6-FAM;5(6)-羧基熒光素質(zhì)量規(guī)格:0.955(6)-Carboxyfluorescein
TNFSF9 Protein Mouse 重組小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 標(biāo)簽)5(6)-FAM, SE; 5(6)-羧基熒光素琥珀酯質(zhì)量規(guī)格:>90%5(6)-FAM, SE
大鼠條紋神經(jīng)元(RNs)(1×106) C6, 大鼠腦細胞 RattusS-腺苷-L-蛋氨酸;S-腺苷甲硫氨酸質(zhì)量規(guī)格:BR,度>96%,干品腺苷蛋氨酸>49%S-adenosyl-L-mine (SAM)
人羊膜細胞;WISH5(6)-ROX ;5(6)-羧基-X-羅丹明鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>95%,進分5(6)-Carboxy-X- rhodamine; 5(6)-ROX
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:超廣譜內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。