|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3667 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
絲菌屬通用PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Erysipelothrix sppPCR | BKP3667 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：絲菌屬通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
ERBB3 Others Mouse 小鼠 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) FISHGELATINBLOCKINGBUFFER,10%魚明膠阻斷試劑蛋白組學(xué)級100mlCOLD
Hep G2 人細(xì)胞雙(1，5-環(huán)忻二1)鎳(-20`C) BIS(1,5-CYCLOOCTcDIqNq)NICKqL(0) 192-32-8
SW 982 [SW-982, SW982]人滑膜細(xì)胞 SW 982 [SW-982, SW982] human synovial sarcoma cells L-15(GIBCO)+10%FBSISOPROPYLALCOHOL異生物技術(shù)級4LRT
內(nèi)皮生長因子乙酸正酯shēng huà shì jì容量：RT1克
大鼠腹部脊髓神經(jīng)元(RVSCI)(1×106) HNE2, 人細(xì)胞系 Human(抑胃肽)
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21酸棗仁皂苷B(標(biāo)準(zhǔn)品)Jujuboside B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
F11R Others Human 人 JAM-A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 穗花杉雙黃酮（標(biāo)準(zhǔn)品）Amentoflavone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
外周血白細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)梭砂貝母堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Hupehenine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
CD300A Others Human 人 CD300A / CMRF-35H / IGSF12 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 特女貞苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Specnuezhenide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
NR8383 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞天麻素(標(biāo)準(zhǔn)品)Gastrodin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
絲菌屬通用PCR檢測試劑盒供應(yīng)A-375(人惡性色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2N-琥珀基-7-羥基-3-羧酸酯(>95.0%(HPLC)(T))N-Succinimidyl 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylate質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(T)
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-琥珀基-7-甲氧基-3-羧酸酯(>98.0%(HPLC)(N))N-Succinimidyl 7-Methoxycoumarin-3-carboxylate質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)
羅猴胎腎細(xì)胞;MA1047-二去甲基米諾環(huán)素二鹽酸7-Didemethyl Minocycline Dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
CALCB Others Human 人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 咪唑立賓鹽酸鹽Mizoribine Hydrobromide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
小梁網(wǎng)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硝苯地平-d6Nifedipine-d6質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
RBE(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×24-磺酰杯[6]芳烴水和物(>95.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)4-Sulfocalix[6]arene Hydrate
Promocell C-28052 DC Generation Medium DXF,樹突狀細(xì)胞生成培養(yǎng)基DXF(即用型) 250ml4-磺酸杯[8]芳烴水合物(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)4-Sulfocalix[8]arene Hydrate
人牙周膜成纖維細(xì)胞總RNAHPLF NA4-叔丁基杯[4]芳烴-O,O',O'',O'''-四乙酸四乙酯(>96.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC)Tetraethyl 4-tert-Butylcalix[4]arene-O,O',O'',O'''-tetraacetate
ITGAX & ITGB2 Others Human 人 ITGAX & ITGB2 Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-叔丁基硫雜杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)4-tert-Butylthiacalix[4]arene
KYSE410 人細(xì)胞4-對乙酰氨基酚硫酸鉀鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口4-Acetaminophen Sulfate Potassium Salt
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
