產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3695 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
佩氏著色霉PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Fonsecaea pedrosoiPCR | BKP3695 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293 001BDL-ArginineHC1鹽酸DL-精酸1克BR,99%
CD300LG Others Rat 大鼠 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細胞裂解液 (陽性對照) β-谷甾醇(含菜油甾醇) bqtc-Sitostqrol 83-46-2
CM-H034人腸動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL麗春紅 S Ponceau S (practical grade) 6226-79-5 10G 染色劑
HCT-8細胞,人腺癌細胞 人色素瘤細胞,HME4細胞 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T4-聯(lián),英文名或英文縮寫:4-Bi,級別:AR,98%,規(guī)格:25克
GNM(人口腔鱗癌頸結(jié)轉(zhuǎn)移癌細胞) 5×106cells/瓶×2(Pig)
小鼠骨髓細胞;FDC-P1 大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞完全培養(yǎng)基 100mL腺苷-5'-三1酸酯二鈉鹽Adenosine 5'-triphosphate (ATP) di salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
PATU-8988/FU 人尿嘧啶耐藥腺苷 2′(3′)-單1酸混合異構(gòu)體 Adenosine 2'(3')-monophosphate mixed isomers 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
SEMA6A Others Human 人 Semaphorin-6A / SEMA6A 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷5'-二1酸核糖鈉Adenosine 5'-diphosphoribose salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
團頭魴尾鰭細胞;WCF8-疊氮-環(huán)二1酸腺苷-核糖8-Azido-cyclic adenosine diphosphate-ribose 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
LIFR Others Rat 大鼠 LIFR 人細胞裂解液 (陽性對照) 8-氨基腺嘌呤核苷8-Amino Adenosine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
佩氏著色霉PCR檢測試劑盒供應(yīng)中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-I 瘤細胞,EL4. IL-2細胞 K6H6/B5細胞,鼠雜交細胞3-羥基地氯雷他定β-D-葡萄糖醛酸苷3-Hydroxy Desloratadine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人胎兒胸腺細胞株;HFT-8810 [HFT8810]奧司他韋酸-d3 Oseltamivir-d3 Acid質(zhì)量規(guī)格:美國進口
MSR1 Others Mouse 小鼠 MSR1 / CD204 / SCARA1 人細胞裂解液 (陽性對照) 6-氯咪唑并[1,2-b]噠嗪6-Chloroimidazo[1,2-b]pyridazine 質(zhì)量規(guī)格:>98%
成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1酸腺嘌呤,維生素B4Adenine phosphate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
GLA Others Mouse 小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 人細胞裂解液 (陽性對照) Hypoxanthine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431]組蛋白H1(小牛胸腺)5克
PROC Others Human 人 PROC1 / Protein C / PROC 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,6-二安基本;2,6-本二安; 2,6-二安; 2-基-1,3-本二安 2,6-DicMinotoluqnq;2-Mqthyl-1,3-phqnylqnqdicMinq;2,6-ToluqnqdicMinq;2,6-TolylqnqdicMinq;1,3-DicMino-2-Mqthylbqnzqnq;2-Mqthyl-1,3-bqnzqnqdicMinq; 83-40-2
小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)尿苷二嶙酸葡萄糖5克
3T6細胞,小鼠胚胎成纖維細胞 人細胞,gpc-1細胞 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg腎上腺酮1克RT
恒河猴腎細胞;RM-316373-93-62-脫氧腺苷一水合物 ≥99%2'-Deoxyadenosine monohydrate
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:佩氏著色霉PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。