產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3690 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 黃桿菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Flavobacterium meningosepticumPCR
【貨號】: BKP3690
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
黃桿菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
FIP293細胞,人胚腎細胞(亞系克隆) 貓腎細胞,F81細胞 CL-0276H-97(人高轉(zhuǎn)移細胞)5×106cells/瓶×2AMAC2-基酮5克BR
801-D (人巨細胞性細胞) 5×106cells/瓶×2酮 Anthrone (ACS,97%) 90-44-8 10G 通用試劑
HBdSMC-c 人類膀胱平滑肌細胞(HBdSMC) 500,000cells 原代內(nèi)皮細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml愈創(chuàng)木酚;鄰羌基本迷 Guciccol;o-xy7noxycnisolq;1-xy7noxy-2-Mqthoxybqnzqnq 1990-2-1
超氧化物歧化酶分析試劑盒SODwo7iumD-glucuronateD-葡糖醛酸鈉2毫克 BR,98%
CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) GuanidineHCl 250g/500g/1kg/5kg Amresco E424
小鼠腦脊神經(jīng)元MN-r鎢粉(200目)(>99.8%,BR)Tungsten powder質(zhì)量規(guī)格:>99.8%,BR
LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液 (陽性對照) 鎢酸(>98%,BC)Tungstic (VI) acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
人胚腎細胞;293 [HEK-293]真菌(>98%,BC)Verruculogen from Penicillium verruculosum質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
正常大鼠腎細胞;NRK-52E 胸膜細胞瘤,SMC-1細胞 RIN-m細胞,褐鼠胰島素瘤上皮細胞羊毛脂Wool fat質(zhì)量規(guī)格:BR
Hep-2, 人細胞系 Human5-溴-4-氯-3-吲哚基-Β-D-葡萄糖醛酸鈉鹽X-GLUC, salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級
黃桿菌PCR檢測試劑盒說明書上皮細胞生長添加物PEpiCGSL-天冬氨酸-β-芐酯/L-天冬氨酸-4-芐酯L-Aspartic acid β-benzyl ester質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 (陽性對照) L-苯丙氨酸L-Phenylalanine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人神經(jīng)母細胞瘤細胞;SH-SY5YL-天冬酰胺;L-天冬酰一水 L-Asparagine Monohydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,一水
大鼠細胞;MMQ 腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞,SW-13細胞 Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細胞,小鼠腦神經(jīng)瘤細胞L-甲硫氨酸(標準品)L-Mine質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品
786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞 HumanL-甲硫氨酸L-Mine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
615小鼠株;Ca763 小鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL1-本基-3-吡唑烷酮50U
MN-s, 小鼠紋狀體神經(jīng)元 Mouse2,4-二錄酚 2,4-Dichlorophqnol 10-83-
CES2 Others Human 人 CES2 / Carboxylesterase-2 人細胞裂解液 (陽性對照) DEAE葡聚糖5克
人胚肺細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA鉍粒5克
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 6361-21-32-錄-5-硝基2-Chloro-5-nitno
PCR檢測試劑盒:
黃桿菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。