產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3684 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
貓庖疹病毒PCR檢測試劑盒價格 | Feline Herpes VirusPCR | BKP3684 |
PCR實(shí)驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
人小細(xì)胞;NCI-H2227 大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL二甲基胂酸鈉shēng huà shì jì容量:10克
A2780/Taxol? 人紫杉醇耐藥株4-安基丁醋;γ-安基丁醋;安酪醋 4-cMinobutyric ccid;γ-cMinobutcnoic ccid;γ-cMinobutyric ccid;Pipqridic ccid 1926-1-
IL17RA Others Mouse 小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 硝基錄化四氮唑藍(lán)shēng huà shì jì容量:25克
大耳山羊肺細(xì)胞;LDG-1200ul無菌盒裝吸頭shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1KU
NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha (ECD) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (尿素(超))
小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元MN-c桑皮苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Mulberroside A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 桑色素(標(biāo)準(zhǔn)品)Morin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠胰腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL沙苑子苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Complanatoside A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
BALL-1人B細(xì)胞急性細(xì)胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內(nèi)含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清山梔苷甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Shanzhiside methylester質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EGF Protein Canine 重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 (His 標(biāo)簽)商陸皂苷甲(標(biāo)準(zhǔn)品)Esculentoside A質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
貓庖疹病毒PCR檢測試劑盒價格人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WPS1雙去氧基姜黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Bisdemethoxycurcumin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TNFRSF9 Others Mouse 小鼠 4-1BB / TNFRSF9 / CD137 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-山梨糖(標(biāo)準(zhǔn)品)L-(-)-Sorbose質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
KP-N-NS 人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤()糖精鈉 水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)Saccharin salt hydrate質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
SiHa人子宮頸鱗癌細(xì)胞 SiHa human uterine cervical squamous cell carcinoma MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.05000mol/L(0.1N))Iodine solution質(zhì)量規(guī)格:0.05000mol/L(0.1N)
SHH Protein Mouse 重組小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (His 標(biāo)簽)標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:水)Iodine solution質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:水
TF-1(人血液細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠細(xì)胞;BC3H1CHAPSO3-[(3-膽胺基)二甲基基]-2-羥基-1-磺酸內(nèi)鹽25克ACS
人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝臟裂解物HMSC-hp L沒食子酸一水物 Gallic acid,≥98.0% 99-24-1 25G 通用試劑
AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 肝速內(nèi);肝速;肝鱗脂 Hqpcrin wo7ium sclt;Hqpscl;Lipohqpin;LiquqMin;Lipohqpinqttq;Longhqpcrin;Monopcrin;Pcnhqprin;Pulcrin 9041-8-1
正常小鼠Leydig細(xì)胞;TM3選擇性巧克力平板1米
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2 III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL13494-80-9碲塊Tellurium
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:貓庖疹病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。