產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3681 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
大片吸蟲通用PCR檢測試劑盒直銷 | Fasciola spp.PCR | BKP3681 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
CM-R067大鼠腎足突細胞完全培養(yǎng)基100mL2-(5-溴-2-偶氮)-5-(二乙基)本酚100毫克保存:-20℃
EC109,人細胞CBZ-D-纈酸 CBZ-D-Valine,99% 1685-33-2 5G 通用試劑
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0926 人腦動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL錄加醋異炳酯(約30%的本,約2mol/L)(+4℃) Isopropyl xlonofonmctq 108-3-6
大鼠肺泡巨噬細胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]動力-吲哚-尿素培養(yǎng)基基礎shēng huà shì jì容量:25克
IL23R Others Rat 大鼠 IL23R / IL23 Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 79803-73-93-(N-嗎啉基)-2-羥基丙磺酸鈉 (MOPSO-Na)MOPSO wo7ium salt
小鼠腎小管上皮細胞MREpiC透明質酸,玻尿酸(分子量80萬-150萬)Hyaluronic Acid 質量規(guī)格:>95%,BR,M.W:80萬-150萬
NXPH1 Others Rat 大鼠 NXPH1 / Neurexophilin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 透明質酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量3K)Hyaluronic Acid 質量規(guī)格:>95%,BR,M.W:3000
HEF 人食道組織來源細胞透明質酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量10K)Hyaluronic Acid 質量規(guī)格:>95%,BR,M.W:10000
CM-R091大鼠成骨細胞完全培養(yǎng)基100mL透明質酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量90K)Hyaluronic Acid 質量規(guī)格:>95%,BR,M.W:90000
Caco-2,人結直腸腺癌細胞透明質酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量4K)Hyaluronic Acid 質量規(guī)格:>95%,BR,M.W:4000
大片吸蟲通用PCR檢測試劑盒直銷人T細胞細胞;HuT 78洛沙坦Losartan Carboxaldehyde質量規(guī)格:美國進口
人卵巢成纖維細胞(HOF) ( 5×105 )N,O-雙(叔丁基二甲硅基)乙酰胺(>95.0%(GC))N,O-Bis(tert-butyldimethylsilyl)acetamide 質量規(guī)格:>95.0%(GC)
CM-R048大鼠腸巨噬細胞完全培養(yǎng)基100mL1-(二甲基異丙基硅基)咪唑(>98.0%(T))1-(Dimethylisopropylsilyl)imidazole質量規(guī)格:>98.0%(T)
小鼠色素瘤細胞;B16 小鼠肝實質細胞完全培養(yǎng)基 100mL1,3-雙(氯甲基)四甲基二硅氮烷(>95.0%(GC))1,3-Bis(chloromethyl)tetramethyldisilazane質量規(guī)格:>95.0%(GC)
MA, 小鼠星形膠質細胞 Mouse1,3-二苯基四甲基二硅氮烷(>95.0%(GC))Tetramethyl-1,3-diphenyldisilazane質量規(guī)格:>95.0%(GC)
EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標簽)2-氨基-4'-氯二苯甲酮質量規(guī)格:大于98%,化學2-amino-4'-chlorobenzophenone
U-87 MG(人神經細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠樹突狀細胞細胞;DCS原百部堿(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Protostemonine
人小氣道上皮細胞裂解物HSAEpiCL雪上一枝蒿甲素質量規(guī)格:標準品,用于含量測定Bullatine A
CTF1 Others Human 人 Cardioophin-1 / CTF1 人細胞裂解液 (陽性對照) 麥冬皂苷D' 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品ophiopogonin D'
小鼠血細胞;WEHI-3 [WEHI3]2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)紫杉醇質量規(guī)格:美國進口2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)paclitaxel
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:大片吸蟲通用PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。