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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3671 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 埃希氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)
【英文名稱】: Escherichia spp.PCR
【貨號(hào)】: BKP3671
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
埃希氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
Hat-78細(xì)胞，人T細(xì)胞瘤 小鼠細(xì)胞,Ranca細(xì)胞 人食道平滑肌細(xì)胞cDNAHESMC cDNAwo7iumBORATEBUFFER硼酸鈉緩沖液超級(jí)白色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma
NEC(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2酚AS-BI1酸二鈉 Naphthol AS-BI phosphate di salt... 530-79-0 50MG 通用試劑
COLO 320(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0166NCI-H1650(人非小細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]慶大每速瓊脂 GqntcMycin cgcr;
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]GinsenosideRb3人參皂甙Rb325克BR
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 112-15-2二乙二醇醋酸酯2-(2-Ethoxyethoxy)etxyl acetate
心肌成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)腺苷3‘，5’-環(huán)單1酸鈉一水合物Adenosine 3′,5′-cyclic monophosphate salt monohydrate 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 腺苷 5‘-（α,β-亞甲基）二1酸鹽，鈉鹽Adenosine 5'-(α,β-methylene)diphosphate, salt質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
大鼠癌細(xì)胞;SHZ-88 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯甲基)-N6-苯甲酰基腺苷 N6-Benzoyl-5'-O-DMT-adenosine質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2 子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)，HCC 94[HCC941122]細(xì)胞 S-180-S2D9細(xì)胞，鼠細(xì)胞8-疊氮腺苷8-Azido Adenosine 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人胚腎二倍體細(xì)胞;CCC-HEK-12-肼基腺苷2-Hydrazino Adenosine 質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;HCC38腺苷 3'-1酸 5'-1酰硫酸鋰鹽水合物Adenosine 3'-phosphate 5'-phosphosulfate lithium salt hydrate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
XCL1 Others Human 人 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) rac (cis/trans)多奈哌齊N-氧化物rac (cis/trans) Donepezil N-Oxide質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
CM-R054大鼠子宮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL6-O-去甲多奈哌齊6-O-Desmethyl Donepezil質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
BPH-1, 人細(xì)胞 B細(xì)胞,XJH細(xì)胞 PLC/PRF/5(人細(xì)胞)脫氫多奈哌齊（多奈哌齊雜質(zhì)）Dehydro Donepezil (Donepezil Impurity)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
倉(cāng)鼠/小鼠雜交瘤細(xì)胞;145-2C11多佐胺中間體Dorzolamide intermediate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口
埃希氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)山羊皮膚細(xì)胞;WGS1尼可地爾-d4質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Nicorandil-d4
Ca Ski, 人細(xì)胞尼可地爾N-氧化物質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Nicorandil N-Oxide
人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞;U251 大鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL6-羥基尼可地爾質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口6-Hydroxy Nicorandil
人組織細(xì)胞瘤細(xì)胞;U937 [U-937]25-脫乙?；Ｆ劫|(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口25-Desacetyl Rifampicin
WFDC2 Others Canine 狗 WAP5 / WFDC2 / HE4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-腺苷質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口L-Adenosine
PCR檢測(cè)試劑盒
埃希氏菌通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
