產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3660 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
馬病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Equine Papilloma Virus(EPV)PCR | BKP3660 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:馬病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
人腎透明細(xì)胞癌;Caki-1 大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鄰本二酸氫鉀shēng huà shì jì容量:2~8℃1克
P388 小鼠細(xì)胞N-乙酰-L-色酸 N-Acetyl-L-tryptophan,98% 1218-34-4 10G 通用試劑
SEMA4A Others Human 人 Semaphorin-4A / SEMA4A / Semaphorin-B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三基典硅烷 Iodotrimqthylsilcnq 1609-98-4
非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1LB肉湯shēng huà shì jì容量:500毫升
人骨骼肌成肌細(xì)胞(HSkMM)(5×105)2273-43-0單丁基氧化錫Butyltin oxide
幼蚊細(xì)胞;C6/36鹽酸達(dá)克羅寧(標(biāo)準(zhǔn)品)Dyclonine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
NLK Others Human 人 nemo-like kinase / NLK 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) SGI-1027SGI1027質(zhì)量規(guī)格:>98%,DNMT抑制劑
CL-0266LS 180(人腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸溴己新(標(biāo)準(zhǔn)品)Bromhexine HCl質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
EPC, 大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞 非洲綠猴腎,BS-C-1細(xì)胞 hFOB 1.19(SV40 轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞)雷西莫特R848,Resiquimod質(zhì)量規(guī)格:>98%,TLR7/TLR8激動(dòng)劑
人低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A羥甲煙胺(標(biāo)準(zhǔn)品)N-(Hydroxymethyl)nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
馬病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格人肺間充質(zhì)干細(xì)胞HPMSC吡嗪酰胺Pyrazinamide質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP
REG4 Others Rat 大鼠 REG4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 阿魏酸,柏酸,反式阿魏酸Ferulic acid質(zhì)量規(guī)格:>99%,合成
大鼠食管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL阿魏酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Ferulic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
A7r5 大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 A7r5 rat thoracic aortic smooth muscle cells 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS安石榴苷Punicalagin (40%)質(zhì)量規(guī)格:40%,BR
EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 標(biāo)簽)安石榴甙(標(biāo)準(zhǔn)品)Punicalagin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
T84人腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞 The cell T84 of human colon adenocarcinoma of lung metastasis D-MEM/F-12培養(yǎng)基+5%FBS2,3-吡嗪二羧酸(>98.0%(HPLC)(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)2,3-Pyrazinedicarboxylic Acid
VEGFA Protein Human 重組人 VEGF 183 / VEGF-A 蛋白茴香偶酰(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)p-Anisil
小鼠腦膜細(xì)胞(MMC)(5×105) CNE1, 人細(xì)胞系 Human苯偶酰(>99.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC)Benzil
兔晶體上皮細(xì)胞永生系;N/N1003A(RLE)苯偶酰 (區(qū)域精制法精制,熔段數(shù):22)質(zhì)量規(guī)格:Benzil Zone Refined (number of passes:22)
FAM3D Others Mouse 小鼠 FAM3D / Oit1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 吡哌酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:供檢查用Pipemidic acid