產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3657 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 馬病毒通用PCR檢測試劑盒直銷
【英文名稱】: Equine Herpesvirus(EHV)PCR
【貨號】: BKP3657
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
馬病毒通用PCR檢測試劑盒直銷其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
Bowes Melanoma細胞,色素瘤細胞 人原髓細胞細胞,AL7P/HL-60R細胞 人結(jié)直腸腺癌細胞;HT-29DNAMarkerⅢ25克
A172(人腦細胞) 5×106cells/瓶×2D(+)-密二糖一水 》99.0% 6-O-cLPHc-D-GcLcCTOPYRcNOSYL-D-GLUCOSq MONOHYDRcTq 66009-10-7
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 1-77) 人細胞裂解液 (陽性對照) A.C.Eformide毛細管電泳級甲先胺測序級50ML1975-2-7Frozen
非洲綠猴腎細胞;VERO75cm2三角斜口細胞培養(yǎng)瓶shēng huà shì jì容量:25克
BTK Others Human 人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Fibrinogen 250mg/1g/5g Sigma F8630
原代單核細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml鹽酸吉西他濱(標準品)Gemcitabine HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
BLK Others Human 人 BLK / B Lymphocyte Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸吉米沙星Gemifioxacin Mesylate質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1甲磺酸吉米沙星(標準品)Gemifioxacin Mesylate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
A549[A-549]細胞,細胞 人細胞,SMMC-7721細胞 T-104BII型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL膽酸鈉 cholate質(zhì)量規(guī)格:>98%,?;蜓蚰懼?/span>,培養(yǎng)基用
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]醋酸胰素Glucagon Acetate質(zhì)量規(guī)格:purity>97%,BR
馬病毒通用PCR檢測試劑盒直銷人肺泡上皮細胞RNAHPAEpiC miRNA5 μg達那唑(標準品)Danazol質(zhì)量規(guī)格:含量測定
FCER1A Others Mouse 小鼠 FcERI / FCER1A 人細胞裂解液 (陽性對照) 氨苯蝶啶(標準品)Triamterene質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定
人臍內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL拉呋替丁Lafutidine質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
HSC-T6細胞,鼠肝星形細胞 SW620(細胞) 人低轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M-2B4拉呋替丁(標準品)Lafutidine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
CSF1 Protein Mouse 重組小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白托可索侖/維生素E聚乙二醇琥珀酸酯Tocofersolan,VE-TPGS質(zhì)量規(guī)格:VE含量≥260.00mg/g as dl-α-tocopherol
A-375[A375]細胞,惡性色素瘤細胞 細胞,Jurk. Clone E6-1細胞 人皮膚鱗癌細胞;A-431 [A431](S)-萘普生異?;?/span>-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口(S)-Naproxen Iso-acyl-β-D-glucuronide
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich(R)-酰基萘普生-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口(R)-Naproxen Acyl-β-D-glucuronide
DKK1 Others Rhesus 恒河猴 DKK-1 / Dkk1 人細胞裂解液 (陽性對照) (1RS)-1-(6-甲氧-2-萘基)乙醇(萘普生雜質(zhì)K)質(zhì)量規(guī)格:美國進口(1RS)-1-(6-Methoxy-2-naphthyl)ethanol (Naproxen Impurity K)
人視網(wǎng)膜色素上皮細胞HRPEpiC6'-甲氧基-2'-萘乙酮 (萘普生雜質(zhì) L)質(zhì)量規(guī)格:美國進口6'-Methoxy-2'-acetonaphthone (Naproxen Impurity L)
EPO Others Rat 大鼠 Erythropoietin / EPO 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (S)-普拉克索二鹽酸化物質(zhì)量規(guī)格:美國進口(S)-Pramipexole Dihydrochloride
PCR檢測試劑盒:
馬病毒通用PCR檢測試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。