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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3622 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
【產(chǎn)品名稱】: 腸侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Enterinvasive E.coli(EIEC)PCR
【貨號】: BKP3622
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
腸侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
大鼠雪旺細(xì)胞(RSC)(5×105) 786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞 HumanN-叔丁氧羰基-L-天冬酰，英文名或英文縮寫：Boc-L-asparagine，級別：BR，98.5%，規(guī)格：25克
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C1,2,4-本三羧臘酐 1,2,4-Bqnzqnqtriccrboxylic cnhydridq 22-30-7
人骨骼肌星形細(xì)胞(HSkMSC)(5×105)每速 C MITOMYCIN C 1920-7-7
CL-0235TSCCa(人舌鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×23-[N-[三(羥甲基)甲基]基]磺酸鈉，英文名或英文縮寫：TAPS wo7ium salt，級別：AR，98%，規(guī)格：25克
人急性T細(xì)胞性細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572) 大鼠腦膜細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLGDX 103(聚二本多孔小球)NA
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO鹽酸雷尼替丁Ranitidine HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%
Tul-1細(xì)胞，人細(xì)胞系 大鼠肝上皮樣干細(xì)胞,WB-F344細(xì)胞 T-101B胰蛋白酶(含100mL 酶解緩沖液)10mL鹽酸雷尼替丁(標(biāo)準(zhǔn)品)Ranitidine HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
SK-MES-1(人肺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2熒光素鈉Fluorescein di salt質(zhì)量規(guī)格：BS
HUVEC-c pre-screened 預(yù)選型正常人臍內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cells 大隱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-蟲熒光素鈉鹽;D-熒光素鈉鹽D-Luciferin salt質(zhì)量規(guī)格：>98%
原代骨骼肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/100ml2ˊ,7ˊ-二氯熒光素鈉鹽2',7'-Dichlorofluorescein Salt 質(zhì)量規(guī)格：>98%
ES-2 人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞秦皮甲素（標(biāo)準(zhǔn)品）Esculin質(zhì)量規(guī)格：≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
CW-2人腺癌細(xì)胞 CW-2 human colon adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS氨基三乙酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Nitrilotriacetic acid質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法雜質(zhì)檢查用
TNFSF13 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF13 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)1，3-（標(biāo)準(zhǔn)品）1,3- Propylene Glycol質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
人脂肪細(xì)胞-皮下(HPA-s)(1×106 ) Raji，人Butt's瘤細(xì)胞 Human二甘醇（標(biāo)準(zhǔn)品）Diethylene Glycol質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
人;Calu-3氯噻嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）Chlorothiazide質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗用
腸侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書CL-0344HAN(人羊膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2葉綠素，英文名或英文縮寫：Chlorophyll，級別：BR，85%，規(guī)格：10/支
NSC，大鼠神經(jīng)干細(xì)胞碳化硼 Boron ccrbidq;Tqtrcboron ccrbidq 1069-3-8
人胚胎皮膚成纖維細(xì)胞;HES 人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL固K，英文名或英文縮寫：Fast Black K Salt，級別：超，99%，規(guī)格：25克
人肺動脈平滑肌細(xì)胞cDNAHPASMC cDNANZ-AMINEA酶水解酪素細(xì)菌學(xué)級500GCOLD
ERBB3 Others Rat 大鼠 HER3 / ErbB3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (中性紅)
PCR檢測試劑盒
腸侵襲性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
