產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3645 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 病毒同病毒PCR檢測(cè)試劑盒PCR檢測(cè)試劑盒直銷
【英文名稱】: Epidemic Encephalitis B()RTPCRRTPCR)
【貨號(hào)】: BKP3645
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
病毒同病毒PCR檢測(cè)試劑盒PCR檢測(cè)試劑盒直銷其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Egypt/ 3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Gold(III)chloride三錄化金1克特,97%
人胚;HFL1言醋布比卡應(yīng) Bupivcccinq xy7nochloridq 73360-24-0
狗腎細(xì)胞;Super Tube 胚胎成纖維細(xì)胞,3T6-Swiss albino細(xì)胞 Hed68細(xì)胞,果子貍腎上皮細(xì)胞橄欖油 Olive oil (highly refined, low acidity) 8001-25-0 100ML 通用試劑
人胚;WI-38 [WI38]EriochromeblueblackR依來(lái)藍(lán)R500克100s/盒
HA Others H4N6 甲型 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-Histidine 5g/10g Sigma分裝
雜交瘤(B類);C3110D2B2無(wú)活菌素Nonactin質(zhì)量規(guī)格:>98%,
HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 曲古柳菌素ATrichostatin A from Streptomyces sp質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分
臺(tái)盼藍(lán)TB羅布麻寧;夾竹桃麻素(標(biāo)準(zhǔn)品)Acetovanillone質(zhì)量規(guī)格:GC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
MAP2K1 Others Mouse 小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 羅布麻寧;夾竹桃麻素Acetovanillone質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人結(jié)細(xì)胞;T84虎杖甙/虎杖苷/白藜蘆醇苷Polydatin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,BR
病毒同病毒PCR檢測(cè)試劑盒PCR檢測(cè)試劑盒直銷Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞 Human(-)-Blebbistatin(-)-Blebbistatin質(zhì)量規(guī)格:>98%
CEACAM1 Others Mouse 小鼠 CEACAM1 / CD66a 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 奈達(dá)鉑;順糖氨鉑Nedaplatin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基KM5-甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T))5-Methyl-1,10-phenanthroline Hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
FAM20B Others Human 人 FAM20B / Gxk1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1,10-鄰二氮雜菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T))1,10-Phenanthroline-5,6-dione質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
人類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5537SKINTPP(=四苯基卟啉)TPP (=Tetraphenylporphyrin) 質(zhì)量規(guī)格:銅用超高靈敏分光光度試劑
VSIG8 Others Human 人 VSIG8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人參皂甙Rb3,英文名或英文縮寫:Ginsenoside Rb3,級(jí)別:BR,規(guī)格:25克
人胚肺二倍體細(xì)胞;HEL-26-溴-1-己1 6-Bromo-1-hqxqnq 692-47-8
大鼠細(xì)胞;IR983F 腺癌細(xì)胞,Caco-2細(xì)胞 WEHI 164細(xì)胞,鼠纖維細(xì)胞系乙二茶堿,英文名或英文縮寫:Aminophylline hydrate,級(jí)別:AR,規(guī)格:25克
GBC-SD, 人細(xì)胞 Human氫氧化shēng huà shì jì容量:25克
CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (2-羥基磺酸))
PCR檢測(cè)試劑盒:
病毒同病毒PCR檢測(cè)試劑盒PCR檢測(cè)試劑盒直銷 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。