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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3638 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)PCR
【貨號】: BKP3638
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 膠原，英文名或英文縮寫：Collagen，級別：BR，300u/mg，芬末，規(guī)格：1公斤
大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J噻苯咪唑 Thiabendazole,98% 148-79-8 25G 通用試劑
KIT Others Rat 大鼠 KIT / c-KIT 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 熒;1,2-本并苊;1,9-本嵌芴 Fluorcnthqnq;Bqnzo[jk]flurqnq;Idryl; 06-44-0
人上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL基本，英文名或英文縮寫：pxenylhydr，級別：CP，98%，規(guī)格：100毫升
Tca8113-P160細(xì)胞，人舌癌細(xì)胞系 大腸埃希氏菌O157：H7 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化);PC-12(低分化)110-26-9N.N’-亞甲基雙酰胺N,N'-metxylenepisacrylamide
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK鹽霉素,沙利霉素Salinomycin質(zhì)量規(guī)格：assay 12%~24%
WI-38細(xì)胞， 人胚肺細(xì)胞 小鼠,L929細(xì)胞 CL-00025637(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2仙茅苷Curculigoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
SMMC-7721(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2丹皮酚原苷；牡丹酚原甙Paeonolide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
HDMEC-c 人真皮微內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)來自少年者 500,000cells 肺微內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)氧化槐定堿(標(biāo)準(zhǔn)品)oxysophoridine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
敘利亞倉鼠細(xì)胞系;Syrian Hamster AV12一葉秋堿 ，一葉萩堿Securinine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，對照品
性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書CM-R082大鼠骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-(羥甲基)煙酰胺N-(Hydroxymethyl)nicotinamide質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
BSG823細(xì)胞，人細(xì)胞 人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞,SK-N-SH細(xì)胞 瘤牛皮膚細(xì)胞;BIN-S1ε-聚賴氨酸Epsilon Polylysine 質(zhì)量規(guī)格：溶解性數(shù)據(jù)為19.8,分子量小于5000
CNE(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2普羅雌1Promestriene質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BR
FCGR3B Others Human 人 CD16b / FCGR3B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 波生坦(水合物)Bosentan hydrate質(zhì)量規(guī)格：≥98.5%（HPLC）,BR,一水合物
人非小細(xì)胞;NCI-H157波生坦水合(標(biāo)準(zhǔn)品)Bosentan hydrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
BLU-87 人膀胱移行細(xì)胞癌 BLU-87 human bladder ansitional cell carcinoma RPMI1640 (內(nèi)含2mM-glutamine)+10%胎牛血清ACRYLAMIDE,40%(W/V)SOLUTION酰胺,40%溶液蛋白組學(xué)級500MLCOLD
BTC Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)2-錄-6-基本安 2-Chloro-6-mqthylcnilinq 87-63-8
MuM-2C(人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)TWEEN20,PEROXIDEFREE,10%吐溫20溶液蛋白組學(xué)級5 Pack9005-64-5RT
腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基MenCM固綠FCF1公斤
EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 76513-69-42-(三價(jià)硅完基)乙氧甲基錄(SEMCl)2-(Trimetxylsilyl)ethoxymetxyl chloride
PCR檢測試劑盒：
性大腸桿菌PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
