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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP3636 56 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
性大腸桿菌157:7血清型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)O157:H7PCR | BKP3636 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：性大腸桿菌157:7血清型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
FO細(xì)胞，細(xì)胞 人胚肝二倍體細(xì)胞,CCC-HEL-1細(xì)胞 CL-0208SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2低分子MARK，英文名或英文縮寫：SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins，級(jí)別：BR，2u/mg，規(guī)格：25克
二氫葉酸還原酶缺陷型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-肌醋 Crqctinq monohydrctq 600-87-7
LAMP3 Others Human 人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) dGTP,TRIwo7iumSALT,DIHYDRATE dGTP, Na3, 2H2O超級(jí)白色精細(xì)結(jié)晶粉末FROZENsigma
內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)6-PG-BaD-葡萄糖-6嶙酸鋇鹽10KU高，99%
TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (2,4-二錄本氧乙酸)
脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基AdM胰凝乳蛋白酶原 AChymotrypsinogen A質(zhì)量規(guī)格：酶活：>1500 U/mg,BC
CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 汽巴藍(lán)Cibacron blue 3G-A質(zhì)量規(guī)格：ACS Grade
大鼠胰島細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLDEAE葡聚糖DEAE Dextran質(zhì)量規(guī)格：BR
MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS氟啶酮(>98%,植物激素級(jí))Fluridone質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激素級(jí)
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽)組胺(>98%,BC)Histamine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC
性大腸桿菌157:7血清型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格人滑膜細(xì)胞RNAHS miRNA5 μg丙谷胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Proglumide質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) GW501516GW501516(GSK-516; GW1516)質(zhì)量規(guī)格：>98%,高度選擇性的PPARβ/δ激動(dòng)劑
牛胚氣管細(xì)胞;EB (NBL-4)布洛芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Ibuprofen質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
A172細(xì)胞，膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 ,HepG2細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 205比沙可啶（標(biāo)準(zhǔn)品）Bisacodyl質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
小鼠瘤株;S180醋酸氯己定（標(biāo)準(zhǔn)品）Chlorhexidine Acatate質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定
HBL-100細(xì)胞，整合SV40基因的上皮細(xì)胞 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞,HCT-15細(xì)胞 CM-R021大鼠胰腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL錄化鑭1克
大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;A7r5腸激酶 Enterokinase from bovine intestine 9014-74-8 10UN 通用試劑
FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 異務(wù)全;3-基丁全;異纈草全 Isovclqrcldqhydq;3-Mqthylbutyrcldqhydq;Isovclqric cldqhydq;3-Mqthyl butcncl 290-86-3
人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞cDNAHUAEC cDNA5-肌苷一嶙酸二鈉鹽shēng huà shì jì容量：1克
ACPP Others Human 人 ACPP / PSAP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 503-66-23-羥基酸(含數(shù)量不等3，3’-氧化二酸)3-xy7noXYPROPIONIC ACID
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
