產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3615 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
腦胞內(nèi)原蟲屬通用·PCR檢測試劑盒供應 | Encephalitozoon spp.·PCR | BKP3615 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
CTLA4 Ig-24細胞,中國倉鼠卵巢細胞 SK-OV-3 [SKOV-3](人細胞) CM-H002人肺大動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mLMetrizamide甲泛影酰胺1毫克優(yōu)質(zhì)級
NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (EGF Domain, Fc 標簽)標準品 Acetochlor 34256-82-1 100MG 標準品
MDA-MB-435(人癌高轉(zhuǎn)移細胞) 5×106cells/瓶×2 腦動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)二茂鐵加醋 Fqrrocqnqccrboxylic ccid 171-4-7
間充質(zhì)干細胞生長添加物-無血清MSCGS-2TRIS-TAPS-EDTA(TTE)BUFFER,10XTTE緩沖液,DNA測序用超級1LRT
NRXN3 Others Human 人 NRXN3 / Neurexin-3-beta 人細胞裂解液 (陽性對照) (n-辛基-b-D-葡萄糖苷)
豬腎傳代細胞;IBRS-2皂土(膨潤土)(Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑)Bentonite質(zhì)量規(guī)格:Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑
CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人細胞裂解液 (陽性對照) 皂土(膨潤土)(Bentone SD-2,適于中高極性溶劑)Bentonite質(zhì)量規(guī)格:Bentone SD-2,適于中高極性溶劑
CL-0157MG-63(人細胞)5×106cells/瓶×2活性炭粉(AR,200目,粉末狀,褐色)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:AR,200目,粉末狀,褐色
L-M TK細胞,鼠胸腺激酶缺陷細胞株 人B細胞瘤細胞系,BJAB細胞 小鼠細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]活性炭(CP,200目,粉末狀,褐色)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:CP,200目,粉末狀,褐色
Ana-1(小鼠巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2活性炭顆粒(AR,20-50目)Activated charcoal質(zhì)量規(guī)格:AR,20-50目
腦胞內(nèi)原蟲屬通用·PCR檢測試劑盒供應人口腔角質(zhì)細胞裂解物HOKL蛋白酶1底物2m,熒光Caspase 1 Substrate 2m (ICE),fluorogenic; Ac-YVAD-AMC質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
IGFBP6 Others Human 人 IGFBP6 / IBP-6 人細胞裂解液 (陽性對照) 蛋白酶3底物1m,熒光Caspase 3 Substrate 1m(Apopain), fluorogenic; Ac-DEVD-AMC質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
BRL-3A 大鼠正常肝細胞抗菌肽B;天蠶絲抗菌肽Cecropin B質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CL-0118HT-29(人細胞)5×106cells/瓶×2卡律蝎Charybdotoxin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
人絨毛間充質(zhì)成纖維細胞促皮質(zhì)素釋放因子,綿羊Corticotropin Releasing Factor,ovine質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
CL-0461UACC-812(人導管瘤細胞)5×106cells/瓶×2噻本隆25克
mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細胞 MSU-2細胞 QSG-7701(肝細胞)黃酮 β-Naphthoflavone 6051-87-2 250MG 通用試劑
人細胞;A498薰衣草油(2-8℃) Lcvcndqr oil 8000-8-0
IL22RA2 Others Human 人 IL22BP / IL22RA2 人細胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)腺苷酸,英文名或英文縮寫:CAMP,級別:試劑級,98.5%,規(guī)格:1克
人毛細胞總RNAHHDPC NA3615-37-0D(+)-海藻糖;D(+)-蕈糖;蕈糖;漏蘆糖;α-D-葡糖苷基-α-D-葡糖苷D(+)-Trehalose;α,α-Trehalose;Natural trehalose;(α-D-Glucosido)-α-D-glucoside;α-D-Glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:腦胞內(nèi)原蟲屬通用·PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。