產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3609 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
反芻獸埃立克體PCR檢測試劑盒直銷 | Ehrlichia ruminantiumPCR | BKP3609 |
技術(shù)服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:反芻獸埃立克體PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔子可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒 8-Azaguanine 中文名:8-氮雜鳥嘌呤 分子式:C4H4N6O
兔子可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISAKit 8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione 中文名: 分子式:C10H9BrN4O2 度:98.0%
兔子可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-(4-(3-Chloropropoxy)-3-methoxyphenyl)ethanone 58113-30-7 中文名: 分子式:C12H15ClO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔子可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol 中文名: 分子式:C13H11ClF3NO 度:98.0%
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒 8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 1265908-20-0 中文名: 分子式:C28H40O3 度:% 關(guān)鍵詞: ; 麥角甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
Iloperidone 中文名:伊潘立酮 分子式:C24H27FN2O4 度:98.0% Cellulose,Microcrystalline 100g
4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid dihydrochloride 中文名:甲磺酸伊馬替尼 分子式:C13H20Cl2N2O2 度:98.0% 頭孢芐 1g
4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one 中文名: 分子式:C10H12N2O2 度:98.0% Cephalexinmonohydrate 5g
N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide 中文名: 分子式:C11H9NO3 度:98.0% 晚期氧化蛋白產(chǎn)物 (AOPP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid 中文名: 分子式:C5H3ClO2S 度:98.0% 轉(zhuǎn)錄因子 AP-1(AP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
反芻獸埃立克體PCR檢測試劑盒直銷藍[pH指示劑] Bromochlorophenol Blue 質(zhì)量規(guī)格:pH指示劑 人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)ELISA檢測試劑盒HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 96T/48T
乙基橙[pH指示劑] Ethyl Orange 質(zhì)量規(guī)格:pH指示劑 大鼠血清素受體2A/5-羥色胺受體2A(5-HT-2A)試劑盒 Rat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxyyptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit
4-乙氧基橘紅鹽酸鹽(>95.0%(T)) 4-Ethoxychrysoidine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 英文名稱RatadiponectinELISAKit大鼠脂聯(lián)素(adiponectin)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
DAABD-Cl [=4-[2-(二甲氨基)乙氨基磺酰]-7-氯-2,1,3-苯并惡二唑 DAABD-Cl [=4-[2-(Dimethylamino)ethylaminosulfonyl]-7-chloro-2,1,3-benzoxadiazole] 質(zhì)量規(guī)格:用于蛋白質(zhì)組分析,用于高效液相色譜標記,熒光染料,用于質(zhì)譜的衍生化試劑 高多糖/酚植物線粒體DNA萃取試劑盒10/20
2,3-萘二醛(>99.0%(GC)) 2,3-Naphthalenedialdehyde 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) ELISAKitf-Hb人游離血紅蛋白規(guī)格:48T/96T
DBD-F [=4-(N,N-二甲氨基磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(HPLC)) DBD-F [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole] 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC) 小鼠顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒 ,英文名: Gzms-B ELISA Kit
N-(1-芘基)馬來(>97.0%(HPLC)) N-(1-Pyrenyl)maleimide 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC) 大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測試劑盒RatTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 96T/48T
愛維莫潘 Alvimopan 質(zhì)量規(guī)格:刪除;精神管制 人蛋白激酶C(PKC)試劑盒 Human protein kinase C,PKC ELISA Kit
3-磺炳基十四烷基二甲甜菜堿 Myristyl sulfobetaine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR RatphosphoProteinKinaseC,P-PKCELISAKit大鼠0酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3-磺炳基十六烷基二甲甜菜堿 3-(N,N-Dimethylpalmitylammonio)propanesulfonate(SHDAB) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR GMS15重組腺病毒載體繁殖超級化學感受態(tài)細菌5X100微升
固深紅 GBC Fast Garnet GBC Salt 質(zhì)量規(guī)格:BS,90% 人解整合素樣金屬蛋白酶15(ADAM15)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 15,ADAM15 ELISA Kit
固紅 3 GL Fast Red 3 GL Salt 質(zhì)量規(guī)格:BS 人解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 19,ADAM19 ELISA Kit
固紅 KL鹽 Fast Red KL Salt 質(zhì)量規(guī)格:BS 人解整合素樣金屬蛋白酶33(ADAM33)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 33,ADAM33 ELISA Kit
固紅B Fast Red B Salt 質(zhì)量規(guī)格:>90% 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit
固紅-萘磺酸 TR Fast Red TR Salt 1,5-naphthalenedisulfonate salt 質(zhì)量規(guī)格:≥90%(TLC) 人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)試劑盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA Kit
麗春紅S Ponceau S 質(zhì)量規(guī)格:BS 人金葡菌腸(SE)ELISA檢測試劑盒Humanstaphylococcusaureuseerotoxins,SEELISAKit 96T/48T
環(huán)丙貝特 Ciprofibrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人金屬硫蛋白(MT)ELISA檢測試劑盒HumanMetallothionein,MTELISAKit 96T/48T
曙紅Y(水溶) Eosin Y water solution 質(zhì)量規(guī)格:BS 人金屬硫蛋白(MT)試劑盒 Human MT ELISA Kit
偶氮胭脂紅B Azocarmine B 質(zhì)量規(guī)格:IND 人金屬硫蛋白2(MT-2)試劑盒 Human MT-2 ELISA Kit
偶氮胭脂紅G Azocarmine G 質(zhì)量規(guī)格:BS 人金屬肽酶含血小板反應蛋白1(ADAMTS1)試劑盒 Human ADAMTS1 ELISA kit
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。