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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3602
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-09
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3602
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書

Edwardsiella spp.PCR

BKP3602

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

兔子膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒     7-Oxo-β-sitosterol  2034-74-4  中文名:7-氧代-β-谷甾醇  分子式:C29H48O2 

兔子膠原酶I(Collagenase I)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  (R,E)-Deca-2-ene-4,6-diyne-1,8-diol  931116-24-4  中文名:  分子式:C10H12O2  度:關(guān)鍵詞:  聚乙炔; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒     7-Methoxy-1-tetralinone  中文名:  分子式:C11H12O2  度:98.0%

兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISAKit     7-Methoxy-1-tetralinone  6836-19-7  中文名:  分子式:C11H12O2  度:98.0%  關(guān)鍵詞: 

兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  (R)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  中文名:(R)-4-芐基-2-惡唑烷酮  分子式:C10H11NO2  度:98.0%
Rosiglitazone maleate 
中文名:馬來酸羅格列酮  分子式:C22H23N3O7S  度:98.0%  豚鼠壞死因子αelisa試劑盒   豚鼠壞死因子α試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豚鼠壞死因子α試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠壞死因子α試劑盒、豚鼠壞死因子αeisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。

Diclofenac   中文名:雙氯芬酸鈉  分子式:C14H10Cl2NNaO2  度:98.0%  豚鼠elisa試劑盒   豚鼠試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   豚鼠試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠試劑盒、豚鼠eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  

Finasteride  中文名:非那雄胺  分子式:C23H36N2O2  度:98.0%  豚鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒  

N-(2-Methyl-5-nitrophenyl)-4- (pyridin-3-yl)pyrimidin-2-amine  中文名:  分子式:C16H13N5O2  度:98.0%  豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒  

Tebipenem pivoxil  中文名:泰比培南酯  分子式:C22H31N3O6S2  度:98.0%  豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA試劑盒
愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書羥基磷灰石  Hydroxyapatite  質(zhì)量規(guī)格:>99%,粒徑20nm RatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

羥丙基甲基纖維素(粘度11250-21000mPas)  Hydroxy Propyl Methyl Cellulose/HPMC K15M  質(zhì)量規(guī)格:粘度11250-21000mPas GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25

羥丙基甲基纖維素  Hydroxypropylmethylcellulose  質(zhì)量規(guī)格:粘度55 - 60 mPa.s MouseTestoterone,TELISA試劑盒小鼠睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

羥丙基甲基纖維素(30000 mpa.s)  HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose  質(zhì)量規(guī)格:30000 mpa.s,BR 小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)ELISA試劑盒 ,英文名: PCNA ELISA Kit

羥丙基甲基纖維素(4000mpas  HPMC, hydroxypropyl methyl cellulose  質(zhì)量規(guī)格:粘度K4m,4000 mpa.s 5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA檢測試劑盒Human5-lipoxygenase,5-LO/LOXELISAKit 96T/48T

麥芽糖;淀粉糖  D-(+)-Maltose monohydrate   質(zhì)量規(guī)格:>92%,一水物 大鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒 Rat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit

ONX-0914 (PR-957)  ONX0914;PR957  質(zhì)量規(guī)格:>98%,immunoproteasome抑制劑 英文名稱RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)規(guī)格:96T/48T

N-壬?;?/span>-N-甲基葡萄糖胺(MEGA9)  N-Nonanoyl-N-methylglucamine  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA高分離試劑盒10/20

甲基纖維素(100000mPa.s)  Methyl cellulose  質(zhì)量規(guī)格:粘度100000mPa.s ELISAKitFT4人游離甲狀腺素規(guī)格:48T/96T

甲基纖維素(4000 mPa.s)  Methyl cellulose, middle viscosity  質(zhì)量規(guī)格:4000mPa.s,BR 小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 ,英文名: AT ELISA Kit
鉤吻素己 HPLC98% 20mg ELISAKit8-epi-PGF2α兔8-異構(gòu)素規(guī)格:48T/96T

鉤吻素甲 GC98% 20mg ELISAKitA1cA1c規(guī)格:48T/96T

鉤吻素子 HPLC98% 20mg ELISAKitAAV人腺相關(guān)病毒規(guī)格:48T/96T

狗牙花堿D HPLC98% 20mg ELISAKitAAV人腺相關(guān)病毒規(guī)格:48T/96T

枸橘苷 HPLC98% 20mg ELISAKitABCA1人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1規(guī)格:48T/96T

枸杞多糖 鑒別 500mg ELISAKitABCG2人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2規(guī)格:48T/96T

檸檬酸 HPLC98% 200mg ELISAKitABP人雄激素結(jié)合蛋白規(guī)格:48T/96T

枸櫞酸血根堿 HPLC98% 20mg ELISAKitAC-1人腺苷酸環(huán)化酶1規(guī)格:48T/96T

構(gòu)樹堿A HPLC98% 5mg ELISAKitACA人腎上腺皮質(zhì)抗體規(guī)格:48T/96T

古倫賓 HPLC98% 20mg ELISAKitACEⅠ人緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶規(guī)格:48T/96T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。


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