產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3590 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
鴨肝炎病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) | Duck Hepatitis Virus 1(DHV1)1RTPCR | BKP3590 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:鴨肝炎病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔子催乳素elisa試劑盒 兔子催乳素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子催乳素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子催乳素試劑盒、兔子催乳素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid 中文名:8-氨基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO3S
兔子催乳素elisa試劑盒 兔子催乳素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子催乳素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子催乳素試劑盒、兔子催乳素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 中文名: 分子式:C28H40O3
兔子催乳素(PRL)ELISA試劑盒 6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 中文名:6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2 度:95.0%
兔子催乳素(PRL)ELISAKit 5-Aminosalicylic acid 中文名:5-氨基水楊酸 分子式:C7H7NO3
兔子促上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one 中文名:6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮 分子式:C29H48O2
Furazolidone 中文名:唑酮 分子式:C8H7N3O5 度:98.0% 豚鼠白介素6(IL-6)ELISAKit
4-Aminobutyric acid 中文名:4-氨基丁酸 分子式:C4H9NO2 度:98.0% 豚鼠/乳過(guò)氧化物酶(LPO)ELISAKit
Gliquidone 中文名:格列喹酮 分子式:C27H33N3O6S 度:98.0% 豚鼠白細(xì)胞間介素 4 英文名稱: Guinea pig Ierleukin 4 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): IL-4
Lansoprazole 中文名:蘭索拉唑 分子式:C16H14F3N3O2S 度:98.0% 豚鼠損傷分子1 英文名稱: Guinea pig Kidney Injury Molecule 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): KIM-1
Gliclazide 中文名:格列齊特 分子式:C15H21N3O3S 度:98.0% 金黃地鼠可溶性間黏附分子1 英文名稱: Golden hamster soluble Vascular Cellular Adhesion Molecule 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): sVCAM-1
鴨肝炎病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)E-64d,蛋白酶抑制劑,阿洛司他丁 E64d,E-64d 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Ratplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2’-脫氧胞苷-5‘-二鈉鹽 dCMP,2Na 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR GST融合蛋白陽(yáng)性表達(dá)點(diǎn)狀印跡篩選試劑盒10
dAMP;2’-脫氧腺苷-5‘-單 2'-Deoxyadenosine 5'-monophosphate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Mousethyroxine,T4ELISA試劑盒小鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
黃素腺嘌呤二核苷酸二鈉鹽 FAD-Na2 質(zhì)量規(guī)格:BR,羅氏進(jìn)分 小鼠抗凝血酶(AT)ELISA試劑盒 ,英文名: AT ELISA Kit
GTP;鳥(niǎo)苷-5‘-三鈉鹽 GTP, 3 Salt 質(zhì)量規(guī)格:>90%,分子生物學(xué)級(jí) 人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanarachidonate5-lipoxygenase,ALOX-5ELISAKit 96T/48T
肌苷-5’-二鈉鹽 5-IMP,2Na 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒 Rat heme oxygenase 2,HO-2 ELISA Kit
尿苷-5’-二鈉鹽(UDP) Uridine 5'-diphosphate salt from 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱RatLaminaPropriaLymphocyteELISAKit大鼠脂蛋白脂酶(LPL)規(guī)格:96T/48T
5’-尿苷酸二鈉(UMP) 5'-UMP-Na2 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA高分離試劑盒10/20
dAMP-Na2;脫氧腺苷二鈉 2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Di salt(dAMP-Na2) 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR ELISAKitF-TESTO人游離睪同規(guī)格:48T/96T
ATP.Na2; 腺苷-5’-三二鈉鹽水合物 5'-ATP-Na2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng),三水合物 小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒 ,英文名: AECA ELISA Kit
肝素鈉/肝磷脂鈉鹽 Heparin 質(zhì)量規(guī)格:細(xì)胞培養(yǎng)級(jí),效價(jià)≥180IU/mg 大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1)試劑盒 Rat Eotaxin 1,Eotaxin 1/CCL11/ECF ELISA Kit
羥乙基-β-環(huán)糊精 HE-β-CD 質(zhì)量規(guī)格:BR,>98%,藥用級(jí) 大鼠嗜酸性粒細(xì)胞過(guò)氧化物酶(EPO)試劑盒 Rat Eosinophil Peroxidase,EPO ELISA Kit
奈福泮/鹽酸平痛新 Nefopam HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,CP 大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)試劑盒 Rat eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit
甲氨蝶呤二鈉鹽 Methotrexate di 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠瘦素(LEP)試劑盒 Rat Leptin,LEP ELISA kit
甲氨蝶呤二鈉鹽 (標(biāo)準(zhǔn)品) Methotrexate di 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠雙氫睪酮(DHT)ELISA檢測(cè)試劑盒RatDihydrotestosterone,DHTELISAKit 96T/48T
鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星 Sarafloxacin HCl 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 大鼠雙氫睪酮(DHT)試劑盒 Rat Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit
鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Sarafloxacin HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAquaporin0,AQP-0ELISAKit 96T/48T
甲硫二苯馬尼/二苯馬尼甲硫酸鹽 Diphemanil mesylate 質(zhì)量規(guī)格:>98% 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)試劑盒 Rat Aquaporin 0,AQP-0 ELISA Kit
甲硫二苯馬尼(標(biāo)準(zhǔn)品) Diphemanil mesylate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAquaporin1,AQP-1ELISAKit 96T/48T
吡嗪-2-羧酸,吡嗪?jiǎn)昔人?/span> 2-Pyrazinecarboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格:含量98%,化學(xué) 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒 Rat Aquaporin 1,AQP-1 ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。