產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3579 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
槍狀肝吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Dicrocoelium dentriticumPCR | BKP3579 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:槍狀肝吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔子S100B蛋白(S-100B)ELISAKit 6-Aminoindole 5318-27-4 中文名:6-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0%
兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISAKit 6-Aminoindazole 6967-12-0 中文名:6-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0%
兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒 6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid 90-51-7 中文名:6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S 度:98.0%
兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 6-Amino-4-hydroxy-2-naphthalenesulfonic acid 90-51-7 中文名:6-氨基-4-羥基-2-萘磺酸 分子式:C10H9NO4S
兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISAKit 9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene 107934-60-1 中文名:9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴 分子式:C27H24N2
Perospirone hydrochloride 中文名:鹽酸哌羅匹隆 分子式:C23H31ClN4O2S 度:98.0% 兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISAKit
中文名:枸櫞酸 分子式:C28H38N6O11S 度:98.0% 兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit
Amlexanox 中文名:氨來(lái)呫諾 分子式:C16H14N2O4 度:98.0% 兔誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)ELISAKit
Losartan 中文名:氯沙坦 分子式:C22H23ClN6O 度:98.0% 兔子孕激素elisa試劑盒 兔子孕激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子孕激素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子孕激素試劑盒、兔子孕激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Glyburide 中文名:格列本脲 分子式:C23H28ClN3O5S 度:98.0% 兔子樣生長(zhǎng)因子1elisa試劑盒 兔子樣生長(zhǎng)因子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子樣生長(zhǎng)因子1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子樣生長(zhǎng)因子1試劑盒、兔子樣生長(zhǎng)因子1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
槍狀肝吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)L-天冬酰胺,無(wú)水物(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Asparagine Anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISA試劑盒小鼠β(TNF-β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-天冬素/L-天冬酰胺 L-Asparagine anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,無(wú)水物 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒 ,英文名: α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit
N'-(三苯甲基)-L-天冬酰胺 N'-Trityl-L-asparagine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA檢測(cè)試劑盒RatpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit 96T/48T
L-天冬氨酸-1-芐酯 L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人帶3蛋白(Band3)試劑盒 Human Band3 protein ELISA kit
L-天門(mén)冬氨酸1-甲酯 L-Aspartic acid 1-methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Ratprostatespecificaigen,PSAELISAKit大鼠特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽 L-Aspartic acid β-methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.98 HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒2
S-甲基-L-半胱氨酸 S-Methyl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:98%,進(jìn)口分包 MouseTumorSpecificGrowthFacter/tumorsuppliedgroupoffactor,TGSFELISA試劑盒小鼠特異生長(zhǎng)因子/相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
S-三苯甲基-L-半胱氨酸 S-Trityl-L-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠抗Smith抗體(Sm)ELISA試劑盒 ,英文名: Sm ELISA Kit
L-谷氨酸1-甲酯 L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:0.97 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)ELISA檢測(cè)試劑盒RatHighmobilitygroupprotein1,HMG-1ELISAKit 96T/48T
L-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽 L-Glutamic acid diethyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.97 人大皰性類(lèi)天皰瘡抗體(BP)試劑盒 Human Bullous Pemphigoid,BP ELISA Kit
富馬酸 HPLC≥98% 20mg DNA產(chǎn)物去鐵化試劑盒20
覆盆子酮 HPLC≥98% 20mg DNA橙(acridineorange)熒光檢測(cè)試劑盒50
覆盆子酮葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg DNA定向連接克隆完全試劑盒(包括雙內(nèi)切酶)10
伽升沃 C HPLC≥98% 20mg DNA合成1樣本
伽升沃 D HPLC≥98% 20mg DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(DNMT)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
甘草查爾酮A HPLC≥98% 20mg DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-1(DNMT-1)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
甘草查爾酮B HPLC≥98% 10mg DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3A(DNMT-3A)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
甘草查爾酮C HPLC≥98% 20mg DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3B(DNMT-3B)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
甘草酸(β型) HPLC≥98% 20mg DNA末端平滑補(bǔ)缺同位素([35S]dATP)聚合酶標(biāo)記試劑盒20
甘草酸十八酯 HPLC≥98% 20mg DNA南方雜交印跡消除試劑盒20
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。