產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3571 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
登革病毒4型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Dengue Virus(DENV)4RTPCR | BKP3571 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:登革病毒4型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit Adipic dihydrazide 中文名:己二酸二 分子式:C6H14N4O2 度:99.0%
兔乙酰膽堿(ACh)ELISA試劑盒 5-O-Ethylcleroindicin D 488138-32-5 中文名: 分子式:C10H16O4 度:% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔乙酰膽堿(ACh)ELISAKit 4-Benzoyloxy-2-azetidinone 28562-58-5 中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮 分子式:C10H9NO3
兔胰淀素(Amylin)ELISAKit 4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 中文名: 分子式:C9H14O4 度:%
兔胰島素樣生長(zhǎng)因子1(rabbit IGF-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine 67219-55-0 中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲?;?/span>-2'-脫氧胞苷 分子式:C37H35N3O7 度:98.0%
2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine 中文名: 分子式:C13H16FN3O6 度:98.0% 兔子組織因子(TF)ELISAKit
Capecitabine 中文名:卡培他濱 分子式:C15H22FN3O6 度:98.0% 兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit
4-(N-Methyl)-aminoantipyrine 中文名: 分子式:C12H15N3O 度:95.0% 兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit
Valsartan methyl ester 中文名: 分子式:C25H31N5O3 度:98.0% 兔子脫氫表雄酯(DHEA-S)ELISA試劑盒
α-D-Glucose 中文名:α-D-葡萄糖 分子式:C6H12O6 度:98.0% 兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
登革病毒4型PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)L-苯甘氨酸甲酯鹽酸鹽 (s)-2-phenylglycine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.98 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAquaporin2,AQP-2ELISAKit 96T/48T
D-丙氨酸乙酯鹽酸鹽 H-D-Ala-OEt·HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP)試劑盒 Human PIP ELISA Kit
利格列汀;利拉利汀 Linagliptin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,二肽肽酶-4(DPP-4)抑制劑 RaeceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-谷氨酸-α-芐酯 L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR HIS標(biāo)記蛋白化試劑盒5
L-亮氨酸乙酯鹽酸鹽 H-Leu-OEt·HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98% MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISA試劑盒小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-丙氨酰胺鹽酸鹽 L-Alanamine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA試劑盒 ,英文名: MIP-1δ/CCL15 ELISA Kit
L-組氨酸鹽酸鹽 L-Histidine monohydrate monohydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,一水 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAquaporin0,AQP-0ELISAKit 96T/48T
L-高精氨酸鹽酸鹽 L-Homoarginine Hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人催乳素抑制激素(PIH)試劑盒 Human PIH ELISA Kit
TPCK(進(jìn)分) TPCK 質(zhì)量規(guī)格:>97%,進(jìn)分,Sigma T4376 RaegulatedonactivationinnormalT-cellexpressedandsecreted,RAESELISAKit大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TPCK TPCK 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR HIS標(biāo)記蛋白擴(kuò)增試劑盒10
氟達(dá)拉賓(標(biāo)準(zhǔn)品) Fludarabine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒 Rat annexin Ⅴ,ANX-Ⅴ ELISA Kit
G-418 硫酸鹽 G-418 disulfate,Geneticin 質(zhì)量規(guī)格:>500U/mg,BR 大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)試劑盒 Rat annexin I,ANX-I ELISA Kit
埃羅替尼 Erlotinib 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) 大鼠膜聯(lián)蛋白IV(ANX-IV)試劑盒 Rat annexin IV,ANX-IV ELISA Kit
N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC) N-Acetyl-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠膜相關(guān)0脂酶A2(PLA2G2A)試劑盒 Rat Phospholipase A2, membrane associated,PLA2G2A ELISA kit
佐匹克隆 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BP2009,BR 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)試劑盒 Rat terminal compleme complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit
佐匹克隆(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISA檢測(cè)試劑盒RatterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 96T/48T
阿尼西坦,回拉西坦;茴拉西坦 Aniracetam 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR 大鼠母親DPP同源物4(Smad 4)試劑盒 Rat mothers against decapeaplegic homolog 4,Smad4 ELISA Kit
阿尼西坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Aniracetam 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒 Rat brain-g peptides,BGP/Gehrelin Elisa kit
L-谷氨酰胺 L-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 大鼠腦啡肽(ENK)試劑盒 Rat enkephalin,ENK ELISA Kit
羅氟司特 Roflumilast 質(zhì)量規(guī)格:含量≥99.0%(HPLC) 大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA檢測(cè)試劑盒RatNeuroglobin,NGBELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。