產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3567 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
布魯塞爾德克酵母PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Dekkera bruxellensisPCR | BKP3567 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:布魯塞爾德克酵母PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISAKit Adrenosterone 382-45-6 中文名:腎上腺甾酮 分子式:C19H24O3
兔血清淀粉樣蛋白Aelisa試劑盒 兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒、兔血清淀粉樣蛋白A elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 7-Acetoxy-4-methylcoumarin 中文名:7-乙酰氧基-4-甲基香豆素 分子式:C12H10O4
兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit 5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 29927-08-0 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S
兔血清(NO)ELISA試劑盒 5'-Deoxy-5-fluorocytidine 中文名: 分子式:C9H12FN3O4 度:99.0%
兔血凝素樣氧化受體1 英文名稱: Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: LOX-1 5'-Deoxy-5-fluorocytidine 66335-38-4 中文名: 分子式:C9H12FN3O4 度:99.0%
n-Octylbenzene 中文名: 分子式:C14H22 度:98.0% 豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2elisa試劑盒 豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2試劑盒、豬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
1-Indanamine hydrochloride 中文名: 分子式:C9H12ClN 度:98.0% 小鼠膽堿0酸甘油酯elisa試劑盒 小鼠膽堿0酸甘油酯試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠膽堿0酸甘油酯試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠膽堿0酸甘油酯試劑盒、小鼠膽堿0酸甘油酯elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Rasagiline mesylate 中文名:甲磺酸雷沙吉蘭 分子式:3S 度:98.0% 豚鼠白介素1受體拮抗劑elisa試劑盒 豚鼠白介素1受體拮抗劑試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豚鼠白介素1受體拮抗劑試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠白介素1受體拮抗劑試劑盒、豚鼠白介素1受體拮抗劑elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
4-Amino-3,5-dichloropyridine 中文名: 分子式:C5H4Cl2N2 度:98.0% 兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa試劑盒 兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒、兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Roflumilast 中文名:羅氟司特 分子式:C17H14Cl2F2N2O3 度:98.0% 兔子皮質(zhì)elisa試劑盒 兔子皮質(zhì)試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子皮質(zhì)試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子皮質(zhì)試劑盒、兔子皮質(zhì)elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
布魯塞爾德克酵母PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)頭孢硫脒;先鋒霉素18號(hào) Cefathiamidine 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR ELISAKitAP人抑肽酶規(guī)格:48T/96T
D-絲氨酸 H-D-Ser-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA試劑盒 ,英文名: MDC/CCL22 ELISA Kit
D-絲氨酸甲酯鹽酸鹽 D-Serine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAquaporin4,AQP-4ELISAKit 96T/48T
D-蘇氨酸 H-D-Thr-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人催產(chǎn)素受體(OX)試劑盒 Human OX ELISA Kit
D-色氨酸甲酯鹽酸鹽 D-Tryptophan methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:0.98 Raetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-乙酰-D-色氨酸 N-Acetyl-D-tryptophan 質(zhì)量規(guī)格:0.98 HOECHST33342和PROPIDIUMIODIDE細(xì)胞膜變檢測(cè)試劑盒50
D-酪氨酸甲酯鹽酸鹽 H-D-Tyr-OMe·HCl 質(zhì)量規(guī)格:0.99 MouseVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor,vaspinELISA試劑盒小鼠內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(vaspin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2'-甲氧基腺;2'-O-甲基腺苷 2'-O-Methyladenosine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(MCSF)ELISA試劑盒 ,英文名: MCSF ELISA Kit
D-纈氨酸 D-Valine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit 96T/48T
2'-脫氧鳥苷-3'-單二鈉 2'-Deoxy-3'-guanylic acid di salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠生成素2(ANG-2)試劑盒 Rat Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit
弗羅利辛 HPLC≥98% 20mg MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein6,IGFBP-6ELISA試劑盒小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
毛冬青皂苷甲 HPLC≥90% 20mg MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein6,IGFBP-6ELISA試劑盒小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
冬青素A, HPLC≥98% 20mg MouseIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISA試劑盒小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
車葉草苷酸 HPLC≥98% 10mg Mouseisletcellaibody,ICAELISA試劑盒小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
曲札茋苷 HPLC≥98% 20mg Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA試劑盒小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
去氧土大黃苷;甲基虎杖苷 HPLC≥98% 20mg Mousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA試劑盒小鼠角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
密力特苷 HPLC≥98% 5mg Mousekeyholelimpethemocyanin,KLHELISA試劑盒小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
靈芝酸C HPLC≥98% 10mg MouseKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISA試劑盒小鼠腎損傷分子1(Kim-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
苦參酮 HPLC≥98% 2mg MouseLactateDehydrogenase,LDHELISA試劑盒小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
異苦參酮 HPLC≥98% 2mg MouseLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。