產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3563 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
巨細(xì)胞病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Cytomegalovirus(CMV)PCR | BKP3563 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:巨細(xì)胞病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒 5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate 13574-13-5 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯 分子式:C17H23NO6 度:98.0%
兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISAKit 6-Benzyloxypurine 中文名:6-芐氧基嘌呤 分子式:C12H10N4O 度:98.0%
兔細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒 5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate 13574-13-5 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸-5-芐酯 分子式:C17H23NO6
兔細(xì)胞間粘附分子-1 (rabbit ICAM-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Benzyl L-glutamate 1676-73-9 中文名:L-谷氨酸5-芐酯 分子式:C12H15NO4 度:98.0%
兔透明質(zhì)酸(rabbit HA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S 度:98.0%
Mumeose K 中文名: 分子式:C25H32O15 度:93.0% 兔子腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
Neochlorogenic acid methyl ester 中文名:新綠原酸甲酯 分子式:C17H20O9 度:97.5% 兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒
Ethyl 3,5-di-O-caffeoylquinate 中文名:3,5-二咖啡??鼘幩嵋阴?/span> 分子式:C27H28O12 度:98.0% 兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒
3-O-(6'-O-Galloyl)-β-D-glucopyranosylmaltol 中文名: 分子式:C19H20O12 度:97.5% 兔子內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒
Falcarindiol 中文名: 分子式:C17H24O2 度:97.0% 兔子腦素/腦尿肽(BNP)ELISAKit
巨細(xì)胞病毒PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)DL-組氨酸 DL-Histidine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 英文名稱RatFree-T4ELISAKit大鼠游離甲狀腺素(Free-T4)規(guī)格:96T/48T
DL-組氨酸鹽酸鹽 DL-Histidine·HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,一水物,BR 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌基因組DNA化試劑盒20
DL-高苯丙氨酸 DL-Homophenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitHBxAg人病毒X抗原規(guī)格:48T/96T
DL-高絲氨酸 DL-Homoserine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠金屬硫蛋白2(MT-2)ELISA試劑盒 ,英文名: MT-2 ELISA Kit
克里唑啼尼鹽酸;克里唑替尼鹽酸 Crizotinib HCl,PF-02341066 HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,MET抑制劑 大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA檢測(cè)試劑盒RatTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit 96T/48T
DL-賴氨酸鹽酸鹽 DL-Lysine·HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人促胰液素/胰泌素(Secretin)試劑盒 Human Secretin ELISA Kit
DL-正纈氨酸 DL-Norvaline 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-正纈氨酸 DL-Norvaline 質(zhì)量規(guī)格:0.99 HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒2
DL-焦谷氨酸 DL-Pyroglutamic acid 質(zhì)量規(guī)格:0.98 MouseVitaminC,VCELISA試劑盒小鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-叔亮氨酸 DL-tert-Leucine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠金屬硫蛋白1(MT1)ELISA試劑盒 ,英文名: MT1 ELISA Kit
非洲防己堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Columbamine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 兔子轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 96T/48T
鹽酸前黃素 Proflavine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 兔子組胺(HIS)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitHistamine,HISELISAKit 96T/48T
阿洛西林鈉 Azlocillin 質(zhì)量規(guī)格:BR,美國(guó)進(jìn)口 兔子組織多肽抗原(TPA)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit 96T/48T
格爾德霉素;格爾德美素 Geldanamycin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 96T/48T
巴佛洛霉素A1 Bafilomycin A1, from Streptomyces griseus 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 兔子組織因子(TF)ELISA檢測(cè)試劑盒rabbitTissuefactor,TFELISAKit 96T/48T
乙丙昔羅鈉 Efaproxiral 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA檢測(cè)試劑盒RabbitTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit 96T/48T
氨來(lái)呫諾;氨來(lái)諾 Amlexanox 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測(cè)試劑盒guineapigIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T
松蘿酸;D-地衣酸(標(biāo)準(zhǔn)品) (+)-Usnic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineapigIerleukin-12,IL-12/P70ELISAKIT 96T/48T
松蘿酸;D-地衣酸 (+)-Usnic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA檢測(cè)試劑盒GuineaPigIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAkit 96T/48T
茴香霉素 Anisomycin, from Streptomyces griseolus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 豚鼠白介素4(IL-4)ELISA檢測(cè)試劑盒Guineapigierleukin4,IL-4ELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。