產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3554 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
庫蚊通用PCR檢測試劑盒說明書 | Culex spp.PCR | BKP3554 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:庫蚊通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔趨化因子(rabbit Raes) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Fluorouracil 中文名: 分子式:C4H3FN2O2
兔素F2aelisa試劑盒 兔素F2a試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔素F2a試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔素F2a試劑盒、兔素F2a elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-Aminoindazole 19335-11-6 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3
兔素E2elisa試劑盒 兔素E2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔素E2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔素E2試劑盒、兔素E2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-Aminofluorescein 中文名:5-氨基熒光素 分子式:C20H13NO5 度:98.0%
兔素E2(rabbit PGE2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Formyl-2-furylboronic acid 27329-70-0 中文名: 分子式:C5H5BO4
兔素E1elisa試劑盒 兔素E1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔素E1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔素E1試劑盒、兔素E1 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-Aminofluorescein 中文名:5-氨基熒光素 分子式:C20H13NO5
4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester 中文名:4,5-二咖啡??鼘幩峒柞?/span> 分子式:C26H26O12 度:97.5% 兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISAKit
Methyl chlorogenate 中文名:綠原酸甲酯 分子式:C17H20O9 度:98.0% 兔子孕激素/孕(PROG)ELISAKit
3,6'-Disinapoylsucrose 中文名:3,6'- 二芥子?;崽?/span> 分子式:C34H42O19 度:98.0% 兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISAKit
Triethyl 中文名:檸檬酸三乙酯 分子式:C12H20O7 度:98.0% 大鼠巨噬細(xì)胞蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISAKit
α-Lipoic acid 中文名:α-硫辛酸 分子式:C8H14O2S2 度:98.5% 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1αelisa試劑盒 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α試劑盒、兔子巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
庫蚊通用PCR檢測試劑盒說明書米爾貝肟 Milbemycin oxime 質(zhì)量規(guī)格:A3+A4>97% Mouseα-galactoyl,GalELISA試劑盒小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
伐地考昔 Valdecoxib 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒 ,英文名: Des ELISA Kit
胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素 Gastrin I,human 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠酸性0酸酶(PAP)ELISA檢測試劑盒RatProstaticAcidPhosphatase,PAPELISAKit 96T/48T
UDPGA Na;尿苷-5'-二葡糖醛酸三鈉鹽 Uridine 5'-diphosphoglucuronic acid tri salt 質(zhì)量規(guī)格:≥98%;美國進(jìn)口 人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒 human coicoopin releasing hormone,CRH ELISA Kit
替卡西林,替卡西林二鈉 Ticarcillin di salt 質(zhì)量規(guī)格:BR,二鈉鹽 RatSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
替卡西林(標(biāo)準(zhǔn)品) Ticarcillin di salt 質(zhì)量規(guī)格:含量測定,二鈉鹽 HRP反應(yīng)終止緩沖液100毫升
RGD肽 Arg-Gly-Asp 質(zhì)量規(guī)格:>97%,integrin抑制劑 Mouseα-Glucosidase,a-GluELISA試劑盒小鼠α葡萄糖苷酶(a-Glu)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
肝素鋰 Heparin lithium 質(zhì)量規(guī)格:>150IU/MG,BR 小鼠接觸蛋白1(CN1)ELISA試劑盒 ,英文名: CN1 ELISA Kit
促胰液素;胰泌素 Secretin Acetate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人β甘露糖苷酶(βManase)ELISA檢測試劑盒Humanβmannosidase,βManaseELISAKit 96T/48T
麝香草酚 Thymol 質(zhì)量規(guī)格:AR 大鼠緊張素原(aGT)試劑盒 Rat angiotensinogen,aGT ELISA Kit
反式玉米素 trans-Zeatin 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 大鼠舒緩激肽(BK)試劑盒 Rat bradykinin,BK ELISA Kit
氯亞鉑酸鉀 Dipotassium tetrachloroplatinate 質(zhì)量規(guī)格:BR,鉑含量 ≥46%,原始鉑粉度>99.95% 大鼠性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA檢測試劑盒RatvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 96T/48T
環(huán)黃芪醇 Cycloastragenol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒 Rat von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit
馬兜鈴酸A Aristolochic acid A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠性因子裂解酶(vWF-cp)試劑盒 Rat von Willebrand Factor cleaving protease,ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit
羥基茜草素/紅紫素(標(biāo)準(zhǔn)品) Purpurin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血紅蛋白(Hb)試劑盒 Rat Hemoglobin,Hb ELISA Kit
酸棗仁皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品) Jujuboside D 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血紅蛋白(HbCO)試劑盒 Rat Carboxyhemoglobin,HbCO ELISA Kit
偽原薯蕷皂苷 Pseduoprotodioscin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血紅素結(jié)合蛋白(HPX)試劑盒 Rat hemopexin,HPX ELISA Kit
氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Oxypaeoniflorin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA檢測試劑盒Rathemeoxygenase1,HO-1ELISAKit 96T/48T
3-異倒捻子素 3-isomangostin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒 Rat heme oxygenase 1,HO-1 ELISA Kit
柚皮苷二氫查爾酮 Naringin dihydrochalcone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA檢測試劑盒Rathemeoxygenase2,HO-2ELISAKit 96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。