產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3549 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
新生隱球菌PCR檢測試劑盒直銷 | Cryptococcus neoformansPCR | BKP3549 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:新生隱球菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISAkit 4-Aminobutyric acid 中文名:4-氨基丁酸 分子式:C4H9NO2 度:98.0%
兔內(nèi)皮細胞生長因子elisa試劑盒 兔內(nèi)皮細胞生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔內(nèi)皮細胞生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔內(nèi)皮細胞生長因子試劑盒、兔內(nèi)皮細胞生長因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-Benzyloxyindole 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO 度:98.0%
兔內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 5-Benzyl-1H-tetrazole 中文名:5-芐基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O 度:98.0%
兔內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISAKit 6-Hydroxyrubiadin 中文名:6-羥基甲基異茜草素 分子式:C15H10O5
兔內(nèi)皮生長因子(rabbit VEGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 5-Chloro-4-methoxy-2-oxo-1,2-dihydropyridine-3-carbonitrile 147619-40-7 中文名: 分子式:C7H5ClN2O2
Acetylatractylodinol 中文名:乙酰蒼術(shù)素醇 分子式:C15H12O3 度:97.5% 兔子葡萄糖依賴性釋放多肽(GIP)ELISAKit
Atractylodin 中文名:蒼術(shù)素 分子式:C13H10O 度:98.0% 兔子細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit
Crenulatin 中文名:大花紅天素 分子式:C11H20O6 度:98.5% 兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit
1-Monopalmitin 中文名:1-棕櫚酸單甘油酯 分子式:C19H38O4 度:98.0% 兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISAKit
Ethyl β-D-apiofuranoside 中文名: 分子式:C7H14O5 度:98.0% 兔子皮質(zhì)/上腺(CO)ELISA試劑盒
新生隱球菌PCR檢測試劑盒直銷D-半胱氨酸鹽酸鹽一水 D-Cysteine hydrochloride monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,BR,一水物 ratCoicosterone,COELISA試劑盒大鼠皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鈣蛋白酶抑制劑II(進口) Calpain Inhibitor II(ALLM) 質(zhì)量規(guī)格:≥95%,美國進口 小鼠靜止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)ELISA試劑盒 ,英文名: QSOX1 ELISA Kit
炔孕酮/素(標準品) Ethisterone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品 人α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISA檢測試劑盒Humanα2-Aiplasmin,α2-APELISAKit 96T/48T
炔孕酮/素 Ethisterone 質(zhì)量規(guī)格:>98% 大鼠生成素1(ANG-1)試劑盒 Rat Angiopoietin 1,ANG-1 ELISA Kit
D-胱氨酸 D-Cystine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 英文名稱RatinducibleniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)規(guī)格:96T/48T
DL-色氨酸 DL-Tryptophan 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 高質(zhì)化膠回收試劑盒20
DL-絲氨酸 DL-Serine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,可用于細胞培養(yǎng) ELISAKithNP/RA33人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物規(guī)格:48T/96T
L-蛋氨酸;甲硫氨酸 L-Mine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠精酸酶(Arg)ELISA試劑盒 ,英文名: Arg ELISA Kit
DL-苯丙氨酸 DL-Phenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA檢測試劑盒Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit 96T/48T
DL-天冬酰胺,一水 DL-Asparagine monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99% 大鼠內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1)試劑盒 Rat vascular cell adhesion protein 1,VCAM-1/CD106 ELISA kit
風(fēng)信子素 HPLC≥98% 20mg differeiation40ligand,sCD40LELISA試劑盒兔子可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蜂斗菜內(nèi)酯A HPLC≥98% 20mg DMDC處理試劑盒100
佛手柑內(nèi)酯 HPLC≥98% 20mg DMDC水500毫升
佛手柑素 HPLC≥98% 20mg DMEM/F12培養(yǎng)基1/10升(片劑)
佛司可林 HPLC≥98% 20mg DMEM培養(yǎng)基1/10升(片劑)
伏格列波糖 HPLC≥98% 20mg DMEM完全培養(yǎng)液(無抗生素)500毫升
扶桑甾醇 HPLC≥98% 10mg DMEM完全培養(yǎng)液500毫升
茯苓酸 HPLC≥98% 5mg DMEM細胞培養(yǎng)基A高糖、谷氨酰胺、同酸B高糖、谷氨酰胺C高糖、同酸D低糖、谷氨酰胺、同酸E無酚紅500毫升
輔酶Q HPLC≥98% 20mg DNA標準樣(100至2000堿基)50
附子靈 HPLC≥98% 20mg DNA產(chǎn)物0酸化處理試劑盒10
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。