產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3543 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
24柯薩奇病毒24型變種PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Coxsackie Virus(CA24v)A24RTPCR | BKP3543 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:24柯薩奇病毒24型變種PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISAKit 5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one 中文名: 分子式:C8H8OS2 度:98.0%
兔結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(rabbit CTGF) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate 239463-72-0 中文名: 分子式:C22H25N3O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 5-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide 183288-46-2 中文名: 分子式:C13H15N3O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit 4-Chloro-6-iodoquinazoline 98556-31-1 中文名: 分子式:C8H4ClIN2
兔交聯(lián)物(PY)ELISAKit 4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl 中文名: 分子式:C14H10BrN 度:98.0%
1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methanol 中文名: 分子式:C9H16O3 度:98.0% 兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒
(S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol 中文名: 分子式:C10H10O2 度:% 兔子凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒
D-arabinitol 中文名: 分子式:C5H12O5 度:% 兔子凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒
3-(Hydroxymethyl)cyclopentanone 中文名: 分子式:C6H10O2 度:% 兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒
12-Hydroxyjasmonic acid 中文名:12-羥基酸 分子式:C12H18O4 度:95.5% 兔子單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒
24柯薩奇病毒24型變種PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)Fmoc-L-賴氨酸鹽酸鹽 Fmoc-Lys-OH·HCl 質(zhì)量規(guī)格:0.98 Humanα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氧化白藜蘆醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Oxyresveratrol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠膠原交聯(lián)(PYD)ELISA試劑盒 ,英文名: PYD ELISA Kit
氧化白藜蘆醇 Oxyresveratrol 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit 96T/48T
乙?;邹继J醇(標(biāo)準(zhǔn)品) Acetyl-resveratrol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)試劑盒 Human MAPKAPK3 ELISA Kit
乙?;邹继J醇 Acetyl-resveratrol 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR RatsolubleIerleukin2recepter,IL-2sRELISAKit大鼠白介素2可溶性受體(IL-2sR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Fmoc-N'-甲基三苯甲基-L-賴氨酸 Fmoc-Lys(Mtt)-OH 質(zhì)量規(guī)格:0.98 Humancytomegalovirus(HCMV)RFLP基因分析試劑盒20
芴甲氧羰基-O-芐基-L-蘇氨酸 Fmoc-Thr(Bzl)-OH 質(zhì)量規(guī)格:0.98 Mouseβ-catenin,β-catELISA試劑盒小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N'-Fmoc-L-賴氨酸 Fmoc-Lys-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒 ,英文名: PY ELISA Kit
Fmoc-天門冬氨酸-β-芐酯 Fmoc-L-aspartic acid β-benzyl ester 質(zhì)量規(guī)格:>98% 大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA檢測(cè)試劑盒RatBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit 96T/48T
芴甲氧羰基-L-天冬氨酸-1-叔丁酯 Fmoc-Asp(OH)-OtBu 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 人α-輔肌動(dòng)蛋白3(ACTN-3)試劑盒 Human ACTN-3 ELISA Kit
二去甲基佐米曲坦 Didesmethyl Zolmitriptan 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatCoicoseroneELISAKit大鼠皮質(zhì)同(Coicoserone)規(guī)格:96T/48T
N-去甲基佐米曲坦 N-Desmethyl Zolmitriptan 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatCoisolELISAKit大鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
佐米曲坦 N氧化物 Zolmitriptan N-Oxide 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatCoisolELISAKit大鼠皮質(zhì)醇(Coisol)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
雌莫司汀 Estramustine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatCPAFELISAKIT大鼠衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)規(guī)格:96T/48T
氨磷汀 Amifostine 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatCRHELISAKit大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
氨磷汀硫醇二鹽酸 Amifostine Thiol Dihydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatCRHELISAKit大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
貝那普利游離堿 Benazepril Free base 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatCrossLapsELISAKit大鼠骨原交聯(lián)(CrossLaps)規(guī)格:96T/48T
拉莫三嗪-13C3 Lamotrigine-13C3 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatCrossLapsELISAKit大鼠骨原交聯(lián)(CrossLaps)規(guī)格:96T/48T
D-半乳糖醛酸甲酯 D-Galacturonic acid methyl ester 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatCTELISAKit大鼠降鈣素(CT)規(guī)格:96T/48T
D-半乳糖醛酸鈉鹽 D-Galacturonic acid salt 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱RatCTELISAKit大鼠降鈣素(CT)規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。