產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3560 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
鯉病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Cyprinid Herpesvirus(CyHV)PCR | BKP3560 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:鯉病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔生成素2elisa試劑盒 兔生成素2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔生成素2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔生成素2試劑盒、兔生成素2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 2516-95-2 中文名: 分子式:C7H4ClNO4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒 5-Benzyloxyindole 1215-59-4 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO 度:98.0%
兔生成素2(ANG-2)ELISAKit 5α-Androstane-3β,17β-diol 571-20-0 中文名:5α-雄烷二醇 分子式:C19H32O2
兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1elisa試劑盒 兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1試劑盒、兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Chloro-2-nitrobenzoic acid 2516-95-2 中文名: 分子式:C7H4ClNO4
兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒 5-Benzyloxyindole 1215-59-4 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO
其它天然產(chǎn)物 兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒
Taxilluside A 中文名: 分子式:C18H24O10 度:97.5% 兔子上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒
n-Butyl β-D-fructofuranoside 中文名:基-β-D-果糖苷 分子式:C10H20O6 度:97.0% 兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒
Palmitone 中文名:棕櫚酮 分子式:C31H62O 度:98.0% 兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒
9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 中文名: 分子式:C18H30O3 度:95.0% 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒
鯉病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格醋酸氟氫可的松(標(biāo)準(zhǔn)品) Fludrocortisone acetate 質(zhì)量規(guī)格:含量97%-103%,標(biāo)準(zhǔn)品 雞核糖核酸(Irna)ELISA檢測(cè)試劑盒ChickenImmuneRNA,IrnaELISAKit 96T/48T
醋酸氟氫可的松 Fludrocortisone acetate 質(zhì)量規(guī)格:>97% 人Ⅲ型前膠原肽(PⅢP)試劑盒 Human procollagen Ⅲ propeptide,PⅢP ELISA Kit
阿折地平 Azelnidipine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 英文名稱MouseTie-2ELISAkit小鼠Tie-2規(guī)格:96T/48T
噻奈普汀酸;噻奈普汀 Tianeptine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 冰凍切片組織EGFR蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
噻奈普汀酸;噻奈普汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Tianeptine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISA試劑盒大鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
噻奈普汀鈉鹽 Tianeptine salt 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP-1/CCL2 ELISA Kit
D-谷氨酰胺 D-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:0.98 雞巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA檢測(cè)試劑盒ChickenAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1ELISAKit 96T/48T
扎托布洛芬 Zaltoprofen 質(zhì)量規(guī)格:>98% 人Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)試劑盒 Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit
甘膽酸鈉 ;甘氨膽酸鈉 Glycocholate Hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98% 英文名稱MouseTie-1ELISAkit小鼠Tie-1規(guī)格:96T/48T
甘露醇;D-甘露糖醇 Mannitol;D-Mannitol 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 冰凍切片組織ERBETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
鳳仙萜四醇苷F HPLC≥98% 20mg Ratansforminggrowthfactor-beta-stimulatedProteinclone-22,TSC22ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β刺激蛋白22(TSC22)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
beta澳洲茄邊堿 HPLC≥98% 20mg Ratansforminggrowthfactorsβ2,TGFβ2ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Levatin HPLC≥98% 20mg Ratansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丹參酸B 鎂鹽 HPLC≥98% 20mg RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
皂甙元CP HPLC≥98% 20mg Ratapelin12,AP12ELISAKit大鼠apelin12(AP12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
皂甙元CP HPLC≥98% 20mg RatApolipoproteinE,Apo-EELISAKit大鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
齊墩果酸ObetaD葡吡喃糖基(→)alphaL吡喃阿拉伯糖苷 HPLC≥98% 20mg RatApolipoproteinH,Apo-HELISAKit大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
去氫紫堇堿 HPLC≥98% 20mg RatapoproteinA1,apo-A1ELISAKit大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,二[(葡萄糖氧)芐基]異丁基蘋果酸酯 HPLC≥98% 20mg RatapoproteinB100,apo-B100ELISAKit大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丹參酮甲酯 HPLC≥98% 20mg Ratapoptosisinducingfactor,AIFELISAKit大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。