產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3537 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
棒桿菌PCR檢測試劑盒直銷 | Corynebacterium ulceransPCR | BKP3537 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:棒桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔壞死因子-a(rabbit TNF-a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Chlorotestosterone acetate 中文名:醋酸氯睪酮 分子式:C21H29ClO3
兔核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒 兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔核因子κB受體活化因子配基試劑盒、兔核因子κB受體活化因子配基elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 4-Methoxy-5-(3-morpholinopropoxy)-2-nitrobenzonitrile 中文名: 分子式:C15H19N3O5 度:98.0%
兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒 4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C8H8N2O4
兔核因子κ B 英文名稱: Rabbit Nuclear factor κB 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NFkB 4-Hydroxythiobenzamide 25984-63-8 中文名: 分子式: 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
兔合酶(rabbit NOS) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 5-Hydroxymethyl-2-furoic acid 6338-41-6 中文名:5-羥甲基-2-糠酸 分子式:C6H6O4
4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone 中文名: 分子式:C9H14O4 度:% 兔子抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒
3,4-O-Isopropylidene shikimic acid 中文名: 分子式:C10H14O5 度:98.0% 兔子白三烯B4(LTB4)ELISAKit
3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione 中文名: 分子式:C8H8O4 度:% 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit
1,18-Octadecanediol 中文名: 分子式:C18H38O2 度:90.0% 兔子白介素6(IL-6)ELISAKit
1,2-O-Isopropylidene-β-D-fructopyranose 中文名: 分子式:C9H16O6 度:98.5% 兔子白介素4(IL-4)ELISAKit
棒桿菌PCR檢測試劑盒直銷亮綠SF(淡黃) Light Green SF Yellowish 質(zhì)量規(guī)格:BS Mouseβ-glucuronidase,βGDELISA試劑盒小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
健那綠B Janus Green B 質(zhì)量規(guī)格:BS 小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA 試劑盒
酸性綠3 Guinea Green B 質(zhì)量規(guī)格:BS,進(jìn)口原裝 Rat soluble E selectin (sE-selectin) ELISA Kit 大鼠可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒
酸性綠 50 Lissamine™ Green B 質(zhì)量規(guī)格:BS,進(jìn)口原裝 HumanAttacinELISAKit 人抗菌肽(Attacin)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
酸性綠A Acid Green A 質(zhì)量規(guī)格:BS,>97%,進(jìn)口分裝 Humanai-EJ-aibody,EJ/GlyRSELISA試劑盒人EJ抗體/抗甘氨酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
吲哚菁綠 Indocyanine Green 質(zhì)量規(guī)格:>94%,BS 植物脊髓過氧化酶(MPO)活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒20
靛藍(lán) Indigotin 質(zhì)量規(guī)格:BS HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit人性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲基藍(lán) Methyl blue 質(zhì)量規(guī)格:AR 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長因子9(FGF9)ELISA試劑盒 ,英文名: FGF9 ELISA Kit
伊文思藍(lán);埃文斯藍(lán) Evans Blue 質(zhì)量規(guī)格:BS,進(jìn)分BIOFER,>85% 雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA檢測試劑盒ChickenCompleme3splitproduct,C3SPELISAKit 96T/48T
曲利苯藍(lán) Trypan Blue 質(zhì)量規(guī)格:BS 人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)試劑盒 Human Procollagen Ⅲ C-terminal Peptide,PⅢCP ELISA Kit
二咖啡酰菊苣酸 HPLC≥98% 20mg CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒2
二羥丙茶堿E HPLC≥98% 20mg COLLAGENII蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25
二氫草莓酸 HPLC≥98% 20mg COLLAGENII蛋白共沉淀分析試劑盒5
二氫丹參酮I HPLC≥98% 20mg COLLAGENI蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25
二氫膽 HPLC≥98% 200mg COLLAGENI蛋白共沉淀分析試劑盒5
二氫膽 HPLC≥98% 20mg Cr.NeoformansRFLP基因分析試劑盒20
二氫黃連堿 HPLC≥98% 20mg CRASP基因甲基化程度定量分析試劑盒20
二氫姜黃素 HPLC≥98% 20mg CREB蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25
二氫辣椒堿 HPLC≥98% 20mg CREB蛋白共沉淀分析試劑盒5
二氫辣椒素酯 HPLC≥98% 10mg CTLA-4/CD152人細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4規(guī)格:48T/96T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。