產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3525 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
短古柏線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Cooperia curticeiPCR | BKP3525 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:短古柏線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
兔白介素17(IL-17)ELISAKit 4-Benzoyloxy-2-azetidinone 28562-58-5 中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮 分子式:C10H9NO3 度:98.0%
兔白介素-12(rabbit IL-12) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate 中文名:N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-4-芐脂 分子式:C19H19NO6
兔白介素-10(rabbit IL-10) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate 中文名:N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-4-芐脂 分子式:C19H19NO6 度:98.0%
兔白介素1(IL-1)ELISA試劑盒 4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-4-芐酯 分子式:C16H21NO6 度:98.0%
兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒 4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate 中文名:N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-4-芐酯 分子式:C16H21NO6
Deoxylapachol 中文名: 分子式:C15H14O2 度:97.0% 兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit
9-Hydroxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H14O4 度:96.0% 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒
Dehydro-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H12O3 度:97.5% 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA試劑盒
α-Lapachone 中文名: 分子式:C15H14O3 度:98.0% 兔壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒
9-Methoxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C16H16O4 度:% 兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
短古柏線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒直銷3-吲哚乙酸(IAA) 3-Indoleacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR ELISAKitIA-2A人胰島細(xì)胞抗原2抗體/蛋白酪氨酸0酸酶抗體規(guī)格:48T/96T
葉酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Folic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒 ,英文名: PTHrP ELISA Kit
葉酸 Folic acid 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 大鼠原(PI)ELISA檢測(cè)試劑盒RatProinsulin,PIELISAKit 96T/48T
托法替尼;CP-690550 Tofacitinib(CP-690550,Tasocitinib) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,JAK3抑制劑 人垂草扁桃酸(VMA)試劑盒 Human VMA ELISA Kit
1-萘乙酸(NAA);α-萘乙酸 1-Naphthylacetic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,Suitable for plant cell culture RatsolubleToll-likereceptor2,sTLR-2ELISAKit大鼠可溶性Toll樣受體2(sTLR2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
變色酸2R Chromotrope 2R 質(zhì)量規(guī)格:AR INSULI-ALPHA蛋白共沉淀分析試劑盒5
磷鉬酸 Phosphomolybdic acid hydrate 質(zhì)量規(guī)格:BC NudeMouseProteinPhosphatase,PPELISA試劑盒裸鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甘氨酸 Glycine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,美侖 小鼠甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA 試劑盒
甘氨酸(Sigma) Glycine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,sigma分裝 Rat soluble cell differeiation aigen 40 Ligand (sCD40L) ELISA Kit 大鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA試劑盒
L-甘氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Glycine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 HumanSurfactaProteinA,SP-AELISAKit 人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
對(duì)乙烯基愈瘡木酚 GC≥98% 20mg Mousethyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISA試劑盒小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磺胺對(duì)甲氧嘧啶 HPLC≥98% 100mg Mousethyroopin-releasinghormone,HELISA試劑盒小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
萘酚磺酸鉀 HPLC≥98% 20mg Mousethyroxine,T4ELISA試劑盒小鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
磺胺異惡唑 HPLC≥98% 250mg MouseThyroxineaibody,TAbELISA試劑盒小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸環(huán)丙沙星 HPLC≥98% 20mg MouseTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISA試劑盒小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
高紫檀素 HPLC≥98% 5mg MouseToll-likereceptor9,TLR-9ELISA試劑盒小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
杠柳毒苷元 HPLC≥98% 20mg Mousetoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISA試劑盒小鼠毒性休克綜合征1(TSST-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甘油三酯 GC≥98% 20mg MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅠ,TNFsR-ⅠELISA試劑盒小鼠可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
α酮戊二酸 HPLC≥98% 20mg MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISA試劑盒小鼠可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D熒光素鉀鹽 98% 20mg MouseTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒小鼠α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。