產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3509 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
溶組織梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Clostridium histolyticumPCR | BKP3509 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:溶組織梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
髓過(guò)氧化物酶(MPO)測(cè)定試劑盒 Ranolazine 中文名:雷諾嗪 分子式:C24H33N3O4
酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣 Withanolide S 63139-16-2 中文名:醉茄內(nèi)酯S 分子式:C28H40O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 南非醉茄; 睡茄交酯; 睡茄內(nèi)酯; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
酸性酯酶染液 Eosinstain 4,4'-Diaminodiphenylsulfone 80-08-0 中文名:4,4'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S 度:98.0%
酸性品紅(復(fù)紅) 5g 4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 843-55-0 中文名:4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式:C18H20O2 度:98.0%
酸性木聚糖酶測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣 Testosterone enanthate 中文名:庚酸睪酮 分子式:C26H40O3
rsodeoxycholic acid 中文名:熊去氧膽酸 分子式:C24H40O4 度:98.0% 兔銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒
Deoxycholic acid 中文名:去氧膽酸 分子式:C24H40O4 度:98.5% 兔細(xì)胞間粘附分子-1 (rabbit ICAM-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Timosaponin AIII 中文名:知母皂苷AIII 分子式:C39H64O13 度:98.5% 兔干擾素-a(rabbit IFN-a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Diosgenin 中文名:薯蕷皂苷元 分子式:C27H42O3 度:98.0% 兔干擾素-β(rabbit IFN-β) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Sarsasapogenin 中文名:菝葜皂苷元 分子式:C27H44O3 度:99.0% 兔干擾素-r(rabbit IFN-r) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
溶組織梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒直銷ZSTK474 ZSTK474;ZSTK-474 質(zhì)量規(guī)格:>98%,I型PI3K亞型抑制劑 英文名稱RatVWFELISAKit大鼠性因子(VWF)規(guī)格:96T/48T
木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷 Luteolin 7-O-glucuronide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品 果菜D-葡萄糖酸鹽比色法定量檢測(cè)試劑盒20
STA-9090;STA9090 Ganetespib 質(zhì)量規(guī)格:>98%,HSP90抑制劑 ELISAKitTAP人胰蛋白酶原激活肽規(guī)格:48T/96T
赤芝酸D Lucidenic acid D 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97% 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4(SDF4)ELISA試劑盒 ,英文名: SDF4 ELISA Kit
DAPT (GSI-IX) DAPT (GSI-IX) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,γ-secretase抑制劑 人尿游離皮質(zhì)醇(UFC)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanurinaryfreecoisol,UFCELISAKit 96T/48T
赤芝酸E Lucidenic acid E 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97% 大鼠纖維蛋白原γ鏈(Fgg)試劑盒 Rat fibrinogen gamma chain,Fgg ELISA kit
利克飛龍 Licofelone 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 英文名稱RatVWFELISAKit大鼠性因子(VWF)規(guī)格:96T/48T
靈芝烯酸C Ganoderenic acid C 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC) 果菜L-天門冬酰胺化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20
生物胞素 Biocytin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分 ELISAKity-Ⅱ人胰蛋白酶原Ⅱ規(guī)格:48T/96T
PU-H71 PUH71 質(zhì)量規(guī)格:>98%,HSP90抑制劑 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒 ,英文名: SDF-1β/CXCL12 ELISA Kit
地黃苷A HPLC≥98% 5mg Chickencarbonicanhydrase,CAELISA試劑盒雞酶(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
地黃苷D HPLC≥98% 5mg ChickenC-ReactiveProtein,CRPELISA試劑盒雞C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
地榆皂苷I HPLC≥98% 20mg ChickenEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒雞表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
地榆皂苷II HPLC≥98% 20mg Chickenfollicle-stimulatinghormone,FSHELISA試劑盒雞促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
靛藍(lán) HPLC≥98% 20mg ChickenGlucagon,GCELISA試劑盒雞胰素(GC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
碟豆素 HPLC≥98% 10mg ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁烯基苯酞 HPLC≥98% 50mg ChickenHeatShockProtein60,HSP-60ELISA試劑盒雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁香酚 HPLC≥98% 0.5ml ChickenIerleukin4,IL-4ELISA試劑盒雞白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁香醛 HPLC≥98% 20mg ChickenIerleukin6,IL-6ELISA試劑盒雞白介素6(IL-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁香樹(shù)脂醇雙葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg ChickenIerleukin9,IL-9ELISA試劑盒雞白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。