產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3502 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
中華枝睪吸蟲PCR檢測試劑盒說明書 | Clonorchis sinensisPCR | BKP3502 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:中華枝睪吸蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
桿菌(YP)核酸檢測試劑盒 48T 3β-Hydroxyergost-5-en-7-one 156767-69-0 中文名: 分子式:C28H46O2
噬中性及細(xì)胞活化肽 -2(NAP-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Testosterone isocaproate 中文名:異己酸睪酮 分子式:C25H38O3
噬酸性粒細(xì)胞趨化因子 -2(Eotaxin-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol 3090-70-8 中文名:3-乙?;?/span>-5α-雄烷二醇 分子式:C21H34O3 度:98.0%
嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白 英文名稱: eosinophil cationic protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ECP 3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 14858-07-2 中文名: 分子式:C28H44O3 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 靈芝; 麥角甾烷; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子 (Eotaxin) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 Biosource 3β,5α,9α-Trihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 88191-14-4 中文名: 分子式:C28H44O4 度:97.0% 關(guān)鍵詞: 靈芝; 麥角甾烷; 對照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
Marsdenoside F 中文名: 分子式:C39H60O14 度:% 兔固(ALD)ELISA試劑盒
8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione 中文名: 分子式:C28H40O3 度:% 兔去甲上腺素(NA)ELISA試劑盒
Schleicheol 1 中文名: 分子式:C30H52O2 度:% 兔去甲上腺素elisa試劑盒 兔去甲上腺素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔去甲上腺素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔去甲上腺素試劑盒、兔去甲上腺素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Uzarigenin digitaloside 中文名: 分子式:C30H46O8 度:97.5% 兔素F2aelisa試劑盒 兔素F2a試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔素F2a試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔素F2a試劑盒、兔素F2a elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Daturametelin I 中文名: 分子式:C34H48O10 度:93.0% 兔素E2elisa試劑盒 兔素E2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔素E2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔素E2試劑盒、兔素E2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
中華枝睪吸蟲PCR檢測試劑盒說明書可的松(美國進(jìn)口) Cortisone 質(zhì)量規(guī)格:>95%,美國進(jìn)口 大鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISA檢測試劑盒Ratdeoxypyridinoline,DPDELISAKit 96T/48T
柳胺酚,利膽酚(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人超敏熱休克蛋白60(HSP-60)試劑盒 Human Ula Sensitive Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit
柳胺酚,利膽酚 2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR RatTestoterone,TELISAKit大鼠睪同(T)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甲磺酸瑞波西汀 Reboxetine mesylate 質(zhì)量規(guī)格:>97% K-Ras鳥苷酸酶活性分析試劑盒6
酮色林,凱他色林 Ketanserin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR PlaVitaminB12,VB12ELISA試劑盒植物維生素B12(VB12)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酮色林,凱他色林(標(biāo)準(zhǔn)品) Ketanserin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP-8 ELISA Kit
章胺鹽酸鹽;正辛弗林 DL-Octopamine HCl 質(zhì)量規(guī)格:>98% 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA檢測試劑盒Ratcross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISAKit 96T/48T
舒林酸 Sulindac 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人超敏特異性抗原(PSA-U S)試劑盒 Human Ula Sensitive Prostate Specific Aigen,PSA U S ELISA Kit
舒林酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulindac 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 RatTGF-beta-inducibleearlyresponsegene-1,TIEG1ELISAKit大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
托品酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Tropic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98% KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒2
蛋白激酶C(19-36);蛋白激酶C選擇性抑制蛋白 Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1(ECM1)ELISA試劑盒 ,英文名: ECM1 ELISA Kit
蛋白激酶C(530-558) Protein Kinase C (530-558) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)ELISA試劑盒 ,英文名: ERK ELISA Kit
甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白拼接同種型3(104-173),人 pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶2(ERK2)ELISA試劑盒 ,英文名: ERK2 ELISA Kit
甲狀旁腺激素(13-34),人 pTH (13-34) (human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)ELISA試劑盒 ,英文名: SOCS-1 ELISA Kit
甲狀旁腺激素(3-34),牛 pTH (3-34) (bovine) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS3)ELISA試劑盒 ,英文名: SOCS3 ELISA Kit
S-I-G-S-L-A-K S-I-G-S-L-A-K 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)ELISA試劑盒 ,英文名: SOCS-3 ELISA Kit
SAMs肽 SAMs Peptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細(xì)胞周期素D1(CCND1)ELISA試劑盒 ,英文名: CCND1 ELISA Kit
猿猴病毒40大抗原氨基段肽段 Simian Virus 40 Large Tumor Antigen Amino-Terminal Peptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒 ,英文名: Cyclin-D1 ELISA Kit
生長抑制素-28 Somatostatin-28 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細(xì)胞周期素D2(CCND2)ELISA試劑盒 ,英文名: CCND2 ELISA Kit
物質(zhì)P(1-7) Substance P (1-7) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒 ,英文名: Cyclin-D2 ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。