產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3460 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
平尾毛細(xì)線蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Capillaria caudinflataPCR | BKP3460 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:平尾毛細(xì)線蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人周期素依賴性激酶1elisa試劑盒 人周期素依賴性激酶1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人周期素依賴性激酶1試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人周期素依賴性激酶1試劑盒、人周期素依賴性激酶1 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Hydroxyquinoxaline 中文名: 分子式:C8H6N2O
人周期素依賴性激酶1(CDK1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CDK1 (Cyclin Depende Kinase 1) ELISA Kit 2-Hydroxy-3-methylanthraquinone 17241-40-6 中文名: 分子式:C15H10O3 度:% 關(guān)鍵詞: 白花蛇舌草; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISAKit 2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid 中文名: 分子式:C19H28INO3 度:98.0%
人重組激活基因2elisa試劑盒 人重組激活基因2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人重組激活基因2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人重組激活基因2試劑盒、人重組激活基因2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Flurbiprofen 51543-40-9 中文名:氟比洛芬 分子式:C15H13FO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人重組激活基因2(RAG-2)ELISA試劑盒 2-Hydroxy-3-methylanthraquinone 中文名: 分子式:C15H10O3
3-Amino-2-naphthoic acid 5959-52-4 中文名:3-氨基-2-萘甲酸 分子式:C11H9NO2 肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A 英文名稱: Pulmonary surfacta associated protein type A 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SP-A
(S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol 78606-95-9 中文名:(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇 分子式:C17H21NO β-谷甾醇 英文名稱: β Sitosterol 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: β Sitosterol
4-Amino-N-methylbenzamide 6274-22-2 中文名:4-氨基-N甲酰胺 分子式:C8H10N2O 同型半胱酸(Hcy)測定試劑盒(酶循環(huán)法)
6-Aminoindole 5318-27-4 中文名:6-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 β-(D3-H)測定試劑盒(酶比色法)
Aminophenazone :C13H17N3O D-二聚體(D-Dimer)測定試劑盒(膠乳增強(qiáng)比濁法)
平尾毛細(xì)線蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格尼群地平 Nitrendipine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISA試劑盒豬腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
尼群地平(標(biāo)準(zhǔn)品) Nitrendipine 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合體亞基4(ARPC4)ELISA試劑盒 ,英文名: ARPC4 ELISA Kit
華蟾毒它靈;華蟾素(標(biāo)準(zhǔn)品) Cinobufotalin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA檢測試劑盒HumanElastaseELISAKit 96T/48T
維甲酰酚胺 Fenretinide(4-HPR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠胃泌酸調(diào)節(jié)素試劑盒 Rat oxyomodulin ELISA Kit
2-氨基嘌呤,異腺嘌呤;異腺素;2-AP 2-Aminopurine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱RatPAPELISAKit大鼠纖溶酶-抗纖溶酶復(fù)合物檢測(PAP)規(guī)格:96T/48T
遠(yuǎn)華蟾蜍精(標(biāo)準(zhǔn)品) Telocinobufagin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 核抗原-FITC標(biāo)記法細(xì)胞凋亡檢測試劑盒10
日蟾蜍他靈;和蟾毒他靈(標(biāo)準(zhǔn)品) Gamabufotalin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitTXB2人素B2規(guī)格:48T/96T
蟾毒它靈(標(biāo)準(zhǔn)品) Bufotaline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠饑餓素(GHRL)ELISA試劑盒 ,英文名: GHRL ELISA Kit
黃尿酸 Xanthurenic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,進(jìn)口 人孤腓肽(OFQ/N)ELISA檢測試劑盒HumanorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit 96T/48T
舒巴坦酸 Sulbactam Acid 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 大鼠胃泌素(Gasin)試劑盒 Rat Gasin ELISA Kit
川陳皮素(標(biāo)準(zhǔn)品) Nobiletin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)ELISA試劑盒 ,英文名: MBL ELISA Kit
川楝素(標(biāo)準(zhǔn)品) Toosendanin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甘露糖受體C1(MRC1)ELISA試劑盒 ,英文名: MRC1 ELISA Kit
川芎嗪(標(biāo)準(zhǔn)品) Tetramethylpyrazine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甘露糖受體C2(MRC2)ELISA試劑盒 ,英文名: MRC2 ELISA Kit
川芎嗪 Tetramethylpyrazine 質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BR 小鼠甘酸脫氫酶(GLDC)ELISA試劑盒 ,英文名: GLDC ELISA Kit
川續(xù)斷皂苷VI;木通皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品) Asperosaponin Ⅵ 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甘油-3-0酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒 ,英文名: GAPDH ELISA Kit
川續(xù)斷皂苷乙(標(biāo)準(zhǔn)品) Dipsacoside B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甘油-3-0酸脫氫酶(GAPDH/G3PDH)ELISA試劑盒 ,英文名: GAPDH/G3PDH ELISA Kit
野鳶尾黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Irisflorentin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠甘油三酯(TG)ELISA試劑盒 ,英文名: TG ELISA Kit
刺芒柄花苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Ononin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肝X受體α(LXRα)ELISA試劑盒 ,英文名: LXRα ELISA Kit
刺五加苷E(標(biāo)準(zhǔn)品) Eleutheroside E 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠源性生長因子(HDGF)ELISA試劑盒 ,英文名: HDGF ELISA Kit
刺五加皂苷B(標(biāo)準(zhǔn)品) Ciwujianoside B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肝表達(dá)趨化因子(LEC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。