產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3482 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
鸚鵡熱衣原體PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Chlamydia psittaciPCR | BKP3482 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:鸚鵡熱衣原體PCR檢測(cè)試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
乳酸脫氫酶elisa試劑盒 乳酸脫氫酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 乳酸脫氫酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:乳酸脫氫酶試劑盒、乳酸脫氫酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 4149/6/8 中文名:3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮 分子式:C9H9N3O 度:98.0%
乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒(微板法) 3-Allylrhodanine 1457-47-2 中文名:3-烯丙基羅丹寧 分子式:C6H7NOS2 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒(微板法) Ranolazine 95635-55-5 中文名:雷諾嗪 分子式:C24H33N3O4
乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒(比色法) Ranolazine 95635-55-5 中文名:雷諾嗪 分子式:C24H33N3O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
乳酸脫氫酶(LDH)檢測(cè) ATP enzyme ( and potassium, calcium and ATP enzyme) detection 3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene 中文名: 分子式:C6H4Cl2OS 度:98.0%
2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole 152628-02-9 中文名: 分子式:C19H20N4 兔骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit
2-Chloro-11-cyclopentyl-5H-benzo[e]pyrimido[5,4-b][1,4]diazepin-6(11H)-one 1521197-43-2 中文名: 分子式:C16H15ClN4O 兔骨保護(hù)素(OPG)ELISAKIT
5'-Deoxy-5-fluorocytidine 66335-38-4 中文名: 分子式:C9H12FN3O4 兔胰淀素(Amylin)ELISAKit
Doxifluridine 3094/9/5 中文名: 分子式:C9H11FN2O5 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit
Tofacitinib 540737-29-9 中文名:枸櫞酸托法替尼 分子式:C22H28N6O8 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體試劑盒、兔骨退化特異性標(biāo)志物CTX-2抗體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
鸚鵡熱衣原體PCR檢測(cè)試劑盒說明書阿齊沙坦 Azilsartan 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人胸腺五肽(TP-5)ELISA檢測(cè)試劑盒Humahymopein,TP-5ELISAKit 96T/48T
阿齊沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Azilsartan 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒 Rat glial cell line-derived neuroophic factor,GDNF ELISA KIT
伊維菌素(標(biāo)準(zhǔn)品) Ivermectin 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatNF-kBELISAKit大鼠NF-kB規(guī)格:96T/48T
SB431542,SB-431542 SB-431542 質(zhì)量規(guī)格:>98%TGF-β抑制劑 卡那霉素溶液10毫克/毫升
米拉貝隆 Mirabegron 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR ELISAKitLMP-1人潛伏膜蛋白1規(guī)格:48T/96T
去氧紫草素(標(biāo)準(zhǔn)品) Deoxyshikonin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠基端前心肽(-ProANP)ELISA試劑盒 ,英文名: -ProANP ELISA Kit
Tariquidar,XR-9576 Tariquidar,XR-9576 質(zhì)量規(guī)格:>98%,P-糖蛋白抑制劑 人自身抗體(IAA)ELISA檢測(cè)試劑盒Humaninsulinaoaibodies,IAAELISAKit 96T/48T
鈦黃;達(dá)旦黃;鈦鎳黃 Titan yellow 質(zhì)量規(guī)格:BS 大鼠膠原交聯(lián)(PYD)試劑盒 Rat pyridinoline,PYD ELISA Kit
雙水楊酯;水楊酸-2-羧基苯酯 Sasapyrine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 英文名稱Ratlymphocytefunctionassociatedaigen-3ELISAKIT大鼠LFA-3(CD58)規(guī)格:96T/48T
雙水楊酯 ;水楊酸-2-羧基苯酯 Sasapyrine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 康奈馨完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
大豆甾醇B HPLC≥98% 5mg Peanagglinin,PNAELISA試劑盒花生凝集素(PNA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大果桉醛 A HPLC≥98% 5mg PEPCIN酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒50
大果桉醛 C HPLC≥98% 5mg pFASTBAC+目的基因SF9昆蟲表達(dá)
大果桉醛 E HPLC≥98% 5mg pGADT7+目的基因酵母雙雜交獵物
大果桉醛 H HPLC≥98% 5mg pGBKT7+目的基因酵母雙雜交誘餌
大果桉醛 I HPLC≥98% 5mg pGEX+目的基因細(xì)菌表達(dá)
大果桉醛 J HPLC≥98% 5mg PGL3BASIC+目的基因報(bào)告基因
大果桉醛 K HPLC≥98% 5mg PH0-2顯色(BRILLIAGREEN)指示溶液50毫升
大果桉醛 L HPLC≥98% 5mg PH2-3顯色(CRESOLRED)指示溶液50毫升
大果桉醛 N HPLC≥98% 5mg PH3-4顯色(METHYLORANGE)指示溶液50毫升
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。