產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3467 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
山羊病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Caprine Herpesvirus(CpHV)PCR | BKP3467 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:山羊病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
人轉(zhuǎn)錄激活因子4(ATF4)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human ATF4 (Activating anscription Factor 4) ELISA Kit 2''-O-Acetylsprengerinin C 1220707-33-4 中文名: 分子式:C46H72O17 度:% 關(guān)鍵詞: 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白elisa試劑盒 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒、人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole 152628-02-9 中文名: 分子式:C19H20N4 度:98.0%
人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)ELISA試劑盒 3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one 中文名: 分子式:C15H18ClNO3 度:98.0%
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGF-β3)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒 Human TGF-β3 (ansforming Growth Factor β3) ELISA Kit 3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal 中文名: 分子式:C21H16FNO
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2elisa試劑盒 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole 152628-02-9 中文名: 分子式:C19H20N4
Folic acid 59-30-3 中文名:葉酸 分子式:C19H19N7O6 兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISAKit
Amprolium hydrochloride 137-88-2 中文名:鹽酸氨丙林 分子式:C14H20Cl2N4 兔6素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒
Furosemide 54-31-9 中文名: 分子式:C12H11ClN2O5S 蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)ELISA試劑盒
Ethyl 3-(4-(methylamino)-3-nitro-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate 429659-01-8 中文名: 分子式:C18H20N4O5 雙花扁豆凝集素(DBA)ELISA試劑盒
8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione 666816-98-4 中文名: 分子式:C10H9BrN4O2 蛇毒因子(CVF)ELISA試劑盒
山羊病毒通用PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)AV-951 Tivozanib, AV951 質(zhì)量規(guī)格:>98%,VEGFR抑制劑 人胰脂肪酶(PL)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPancreaticLipase,PLELISAKit 96T/48T
7,8-二氫生物蝶呤 7,8-Dihydro-L-biopterin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>95%,BR 大鼠細(xì)胞毒性T細(xì)胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)試劑盒 Rat Cytotoxic T Lymphocyte Associated Aigen 4,CTLA-4 ELISA Kit
整形素 Chlorflurenol-methyl 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR 英文名稱RatoponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTnI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
帕拉米韋三水合物 Peramivir Trihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 海洋動(dòng)物(蝦貝類)線粒體粗提分離試劑盒10/50
神經(jīng)保護(hù)劑NXY059 NXY-059,Cerovive 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR ELISAKitFPA人血纖肽/纖維蛋白肽A規(guī)格:48T/96T
L-犬尿氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品) L-Kynurenine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌肌酸激酶(CKM)ELISA試劑盒 ,英文名: CKM ELISA Kit
磺胺二甲氧嗪; 磺胺二甲氧基嘧啶 Sulfadimethoxine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 人胰淀粉酶(PAMY)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanPancreaticAmylase,PAMYELISAKit 96T/48T
磺胺二甲氧基嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfadimethoxine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)因子BAX(BAX)試劑盒 Rat Apoptosis regulator BAX,BAX ELISA kit
奧斯他偉酸;奧司他韋羧酸 Oseltamivir acid 質(zhì)量規(guī)格:>97,BR 英文名稱RatcardiacoponinIELISAKit大鼠心肌肌鈣蛋白I(cTNI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
alpha-熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品) alpha-Arbutin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 海洋動(dòng)物種系18sRNA基因擴(kuò)增分析試劑盒20
促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),人 ACTH(1-39),human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠頭蛋白(NOG)ELISA試劑盒 ,英文名: NOG ELISA Kit
促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39),大鼠 ACTH (1-39), rat 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒 ,英文名: HA ELISA Kit
促腎上腺皮質(zhì)激素(18-39),人 ACTH (18-39), human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
促腎上腺皮質(zhì)激素(4-10),人 ACTH (4-10), human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit 96T/48T
髓質(zhì)肽(22-52),人 Adrenomedullin (22-52),human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒 ,英文名: HABP ELISA Kit
咽側(cè)體抑制素Ⅳ Allatostatin IV 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白1(HABP1)ELISA試劑盒 ,英文名: HABP1 ELISA Kit
糊精肽,人 Amylin,human 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠突觸核蛋白α(SNCα)ELISA試劑盒 ,英文名: SNCα ELISA Kit
緊張素A Angiotensin A 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠突觸極蛋白2(SYNPO2)ELISA試劑盒 ,英文名: SYNPO2 ELISA Kit
緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑 Angiotensin ConvertingEnzyme Inhibitor 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠突觸囊泡蛋白Ⅰ(SYT1)ELISA試劑盒 ,英文名: SYT1 ELISA Kit
緊張素原(1-14),大鼠 Angiotensinogen (1-14) ,Rat 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠突觸融合蛋白1A(STX1A)ELISA試劑盒 ,英文名: STX1A ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。