產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3438 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
伯克氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書 | Burkholderia spp.PCR | BKP3438 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3Gelisa試劑盒 人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒、人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 2-Chloro-1-(5'-(prop-1-ynyl)-2,2'-bithiophen-5-yl)ethanol 中文名: 分子式:C13H11ClOS2
人絲切蛋白1(CFL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human CFL1(Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit 2-Aminofluorene 中文名:2-氨基芴 分子式:C13H11N
人瘦素受體(LEPR)ELISAKit Tiagabine hydrochloride 中文名:鹽酸噻加賓 分子式:C20H26ClNO2S2
人瘦素 (Leptin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 α-Spinasterone 23455-44-9 中文名: 分子式:C29H46O
人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISAKit 2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide 24522-30-3 中文名: 分子式:C10H7F3N2O
5-Benzyl-1H-tetrazole 18489-25-3 中文名:5-芐基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O 計(jì)數(shù)液 Alkaline phosphatase stain
Benzyl 4-hydroxybenzoate 94-18-8 中文名:4-羥基苯甲酸芐酯 分子式:C14H12O3 Acid phosphatase stain
(-)-Noe's Reagent 108031-79-4 中文名:(-)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑 分子式:C24H38O3 定性測試盒 Acid esterase stain
2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane 2024-88-6 中文名:2,2-雙(4-氯甲酰氧苯基)丙烷 分子式:C17H14Cl2O4 嗜肺軍團(tuán)桿菌(LP)核酸檢測試劑盒 48T
3,6-Bis(hydroxymethyl)durene 7522-62-5 中文名:3,6-雙(羥甲基)杜烯 分子式:C12H18O2 綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
伯克氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書TES. Na;2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸鈉 TES 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA檢測試劑盒RatFollistatin,FSELISAKit 96T/48T
TES;Tris乙磺酸,2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸 TES 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)試劑盒 Human Compleme 3 split product,C3SP ELISA Kit
3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉 TAPSO mono 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
TAPSO;3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸 TAPSO 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR MAPK蛋白共沉淀分析試劑盒5
N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉 TAPS Salt 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Porcinediamineoxidase,DAOELISA試劑盒豬氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,1-環(huán)丙基乙二羧酸 1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX5 ELISA Kit
TAPS;N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸 TAPS 質(zhì)量規(guī)格:>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA檢測試劑盒HumanOrexinB,OX-BELISAKit 96T/48T
PI3K 抑制劑 LY294002 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,進(jìn)分 大鼠維生素C(VC)試劑盒 Rat Vitamin C,VC ELISA Kit
羥乙基磺酸鈉 SHES 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 英文名稱RatMotilinELISAKit大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羥乙基醋酸鉀 PHES 質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 赫特法病毒DNA化試劑盒10/20
補(bǔ)骨脂定 HPLC≥98% 20mg 5%ferricammoniumsulfate溶液500毫升
補(bǔ)骨脂二氫黃酮 HPLC≥98% 20mg 5%蛋白電泳聚集預(yù)制膠溶液500毫升
補(bǔ)骨脂酚 HPLC≥98% 20mg 5’端銜接體(LINKER)連接試劑盒20
補(bǔ)骨脂寧 HPLC≥98% 20mg 5’末端DNA探針同位素([γ32P]ATP)激酶標(biāo)記試劑盒20
補(bǔ)骨脂素 HPLC≥98% 20mg 5’末端DNA探針同位素([γ32P]ATP)激酶標(biāo)記試劑盒20
菜油甾醇 HPLC≥98% 10mg 50倍Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升
蒼耳亭 HPLC≥98% 5mg 50倍Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升
蒼術(shù)苷A HPLC≥98% 20mg 50倍Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升
蒼術(shù)苷鉀鹽 HPLC≥98% 20mg 50毫升玻璃勻漿器1個(gè)
蒼術(shù)素 HPLC≥98% 20mg 5-HIAA高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒20
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:伯克氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。