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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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伯克氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP3438
  • 價(jià)格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-06
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP3438
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進(jìn)口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

伯克氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書

Burkholderia spp.PCR

BKP3438

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3Gelisa試劑盒   人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G試劑盒、人絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。     2-Chloro-1-(5'-(prop-1-ynyl)-2,2'-bithiophen-5-yl)ethanol  中文名:  分子式:C13H11ClOS2 

人絲切蛋白1(CFL1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human CFL1(Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit                 2-Aminofluorene  中文名:2-氨基芴  分子式:C13H11N 

人瘦素受體(LEPR)ELISAKit     Tiagabine hydrochloride  中文名:鹽酸噻加賓  分子式:C20H26ClNO2S2 

人瘦素 (Leptin)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     α-Spinasterone  23455-44-9  中文名:  分子式:C29H46O 

人嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISAKit     2-Cyano-N-[4-(Trifluoromethyl)Phenyl]Acetamide  24522-30-3  中文名:  分子式:C10H7F3N2O
5-Benzyl-1H-tetrazole  18489-25-3 
中文名:5-芐基-1H-四唑  分子式:C8H8N4O    計(jì)數(shù)液   Alkaline phosphatase stain

Benzyl 4-hydroxybenzoate  94-18-8  中文名:4-羥基苯甲酸芐酯  分子式:C14H12O3       Acid phosphatase stain

(-)-Noe's Reagent  108031-79-4  中文名:(-)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑  分子式:C24H38O3    定性測試盒   Acid esterase stain              

2,2-Bis(4-chloroformyloxyphenyl)propane  2024-88-6  中文名:2,2-(4-氯甲酰氧苯基)丙烷  分子式:C17H14Cl2O4    嗜肺軍團(tuán)桿菌(LP)核酸檢測試劑盒   48T

3,6-Bis(hydroxymethyl)durene  7522-62-5  中文名:3,6-(羥甲基)杜烯  分子式:C12H18O2    綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T
伯克氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書TES. Na;2-[((羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸鈉  TES   質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA檢測試劑盒RatFollistatin,FSELISAKit 96T/48T

TESTris乙磺酸,2-[(三(羥甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸  TES  質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR 人補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)試劑盒 Human Compleme 3 split product,C3SP ELISA Kit

3-[ (N-(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉  TAPSO mono  質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

TAPSO;3-[ (N-(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸  TAPSO  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR MAPK蛋白共沉淀分析試劑盒5

N-(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉  TAPS  Salt  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR Porcinediamineoxidase,DAOELISA試劑盒豬氧化酶(DAO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

1,1-環(huán)丙基乙二羧酸  1,1-Cyclopropanedicarboxylic acid  質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX5 ELISA Kit

TAPS;N-(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸  TAPS  質(zhì)量規(guī)格:>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級 人食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA檢測試劑盒HumanOrexinB,OX-BELISAKit 96T/48T

PI3K 抑制劑  LY294002  質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,進(jìn)分 大鼠維生素C(VC)試劑盒 Rat Vitamin C,VC ELISA Kit

羥乙基磺酸鈉  SHES  質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 英文名稱RatMotilinELISAKit大鼠胃動素(MTL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

羥乙基醋酸鉀  PHES  質(zhì)量規(guī)格:>98.5% 赫特法病毒DNA化試劑盒10/20
補(bǔ)骨脂定 HPLC98% 20mg 5%ferricammoniumsulfate溶液500毫升

補(bǔ)骨脂二氫黃酮 HPLC98% 20mg 5%蛋白電泳聚集預(yù)制膠溶液500毫升

補(bǔ)骨脂酚 HPLC98% 20mg 5’端銜接體(LINKER)連接試劑盒20

補(bǔ)骨脂寧 HPLC98% 20mg 5’末端DNA探針同位素([γ32P]ATP)激酶標(biāo)記試劑盒20

補(bǔ)骨脂素 HPLC98% 20mg 5’末端DNA探針同位素([γ32P]ATP)激酶標(biāo)記試劑盒20

菜油甾醇 HPLC98% 10mg 50Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升

蒼耳亭 HPLC98% 5mg 50Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升

蒼術(shù)苷A HPLC98% 20mg 50Dendha核酸雜交封閉溶液100毫升

蒼術(shù)苷鉀鹽 HPLC98% 20mg 50毫升玻璃勻漿器1個(gè)

蒼術(shù)素 HPLC98% 20mg 5-HIAA高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒20

特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:伯克氏菌通用PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。


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