產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3417 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
牛病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒直銷 | Bovine Viral Diarrhea Virus 2 (BVDV2)2RTPCR | BKP3417 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:牛病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
球蛋白IgM 英文名稱: immunoglobulin M 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IgM Testosterone undecanoate 中文名:十一酸睪酮 分子式:C30H48O3
球蛋白 IgG(IgG) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ponasterone A 13408-56-5 中文名:坡那甾酮A 分子式:C27H44O6
球蛋白 IgE(IgE) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ponasterone A 13408-56-5 中文名:坡那甾酮A 分子式:C27H44O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 臺(tái)灣羅漢松; 蛻皮甾; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
球蛋白 IgA(IgA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Ponasterone A 中文名:坡那甾酮A 分子式:C27H44O6
綿羊球蛋白G 英文名稱: Immunoglobulin G 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IgG 3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2
2-Amino-3-chloro-1,4-naphthoquinone 2797-51-5 中文名:2-氨基-3-氯-1,4-萘醌 分子式:C10H6ClNO2 還原型谷胱甘肽(GSH)測(cè)定試劑盒(微板法)
2-Amino-6-chlorobenzothiazole 95-24-9 中文名:2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S 乳酸(LD)測(cè)試盒(測(cè)全血) Lactic acid (LD) test case (whole blood)
Solvent Yellow 3 97-56-3 中文名:溶劑黃 分子式:C14H15N3 乳酸(LD)測(cè)試盒(測(cè)血清、組織等) Lactic acid (LD) test case (serum, tissue, etc.)
3-Acetylcoumarin 3949-36-8 中文名:3-乙?;愣顾?/span> 分子式:C11H8O3 乳酸脫氫酶(LDH)測(cè)試盒 Lactate dehydrogenase (LDH) test kit
7-Acetoxy-4-methylcoumarin 2747/5/9 中文名:7-乙酰氧基-4-甲基香豆素 分子式:C12H10O4 蘋果酸脫氫酶測(cè)試盒(測(cè)血清) Apple acid dehydrogenase test case (Ce Xueqing)
牛病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒直銷黃柏酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Obacunone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT)ELISA檢測(cè)試劑盒Humaerminaldeoxynucleotidylansferase,TdTELISAKit 96T/48T
黃豆黃苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Glycitin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠銅藍(lán)蛋白(CP)試劑盒 Rat ceruloplasmin(ferroxidase)(CP)ELISA kit
黃豆黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Glycitein 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatcarbonicanhydraseELISAKit大鼠酶(CA)規(guī)格:96T/48T
黃獨(dú)素B(標(biāo)準(zhǔn)品) Diosbulbin B 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 化妝品阿斯巴塘(aspaame)含量薄層色譜法定性檢測(cè)試劑盒20
黃連堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Coptisine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 ELISAKitVEGF-B人內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子B規(guī)格:48T/96T
黃芪皂苷I(標(biāo)準(zhǔn)品) Astragaloside I 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠含TCP1伴侶蛋白亞基2(CCT2)ELISA試劑盒 ,英文名: CCT2 ELISA Kit
黃芪皂苷II(標(biāo)準(zhǔn)品) Astragaloside II 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人脫氧尿三0酸(DP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humandeoxyuridineiphate,DPELISAKit 96T/48T
黃芪皂苷III(標(biāo)準(zhǔn)品) Astragaloside III 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠同型半胱氨酸(Hcy)試劑盒 Rat Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit
黃芪總皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Astragaloside 質(zhì)量規(guī)格:UV≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatcarbonicanhydraseELISAKit大鼠酶(CA)規(guī)格:96T/48T
黃杞苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Engeletin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 化妝品阿斯巴塘(aspaame)含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20
半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品) D-GALACTOSE 1-[2-(2-AZIDOETHOXY)ETHOXYETHYL]-2,3,4,6-TETRA-O-ACETATE 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 小鼠卵0脂膽脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)ELISA試劑盒 ,英文名: LCAT ELISA Kit
富馬酸氯馬斯汀(標(biāo)準(zhǔn)品) Clemastine fumarate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC含量測(cè)定 小鼠卵白蛋白(OVA)ELISA試劑盒 ,英文名: OVA ELISA Kit
富馬酸氯馬斯汀 Clemastine fumarate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠卵泡抑素(FS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
富馬酸酮替芬(標(biāo)準(zhǔn)品) Ketotifen fumarate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠卵泡抑素(FS)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseFollistatin,FSELISAKit 96T/48T
己內(nèi)酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-Oxohexamethylenimine 質(zhì)量規(guī)格:供檢查用 小鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒 ,英文名: FS ELISA Kit
苯丙哌啉(標(biāo)準(zhǔn)品) Benproperine phosphate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3)ELISA試劑盒 ,英文名: FSTL3 ELISA Kit
米諾地爾(標(biāo)準(zhǔn)品) Minoxidil 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒 ,英文名: OVA sIgE ELISA Kit
7-羥基-4-甲基香豆素(標(biāo)準(zhǔn)品) 7-Hydroxy-4-methylcoumarin 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit 96T/48T
7-羥基-4-甲基香豆素 7-Hydroxy-4-methylcoumarin 質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR 小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒 ,英文名: OVA sIgG ELISA Kit
十一酸睪酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Testosterone undecanoate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 小鼠輪狀病毒(RV)抗原(Ag)ELISA試劑盒 ,英文名: Ag ELISA Kit
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。