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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ketoconazole  中文名：酮康唑  分子式：C26H28Cl2N4O4 

小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Jacaranone  60263-07-2  中文名：  分子式：C9H10O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  細(xì)胞毒活性; 果膠幼蟲變態(tài)誘導(dǎo)劑; 千里光屬; 雪葉蓮屬; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ketoconazole  65277-42-1  中文名：酮康唑  分子式：C26H28Cl2N4O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Jacaranone  中文名：  分子式：C9H10O4  度：98.0%

小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Ketoconazole  65277-42-1  中文名：酮康唑  分子式：C26H28Cl2N4O4
T84細(xì)胞，細(xì)胞 色素瘤細(xì)胞,NW38細(xì)胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0919L-天門冬氨酸1-甲酯L-Aspartic acid 1-methyl ester質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

HCC1937(癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2L-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽L-Aspartic acid β-methyl ester 質(zhì)量規(guī)格：0.98

ARSA Others Mouse 小鼠 ARSA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) S-甲基-L-半胱氨酸S-Methyl-L-cysteine質(zhì)量規(guī)格：98%，進(jìn)口分包

Burkkit瘤細(xì)胞;DaudiS-三苯甲基-L-半胱氨酸S-Trityl-L-cysteine質(zhì)量規(guī)格：>98%

CTNNB1 Others Mouse 小鼠 beta-Catenin / CTNNB1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) L-谷氨酸1-甲酯L-Glutamic Acid 1-Methyl Ester質(zhì)量規(guī)格：0.97
TE-10細(xì)胞，細(xì)胞 腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,TG-905細(xì)胞 家貓皮膚細(xì)胞;FCA-S1試亞鐵靈Ferroin indicator solution質(zhì)量規(guī)格：AR

Calu-1(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鈣紅,乙二醛縮雙（鄰氨基酚）Glyoxal-bis(2-hydroxyanil)質(zhì)量規(guī)格：AR；98%

PTPRC Others Human  CD45 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 羥基萘酚藍(lán)Hydroxynaphthol blue質(zhì)量規(guī)格：金屬滴定指示劑

小鼠前細(xì)胞;MFC硼試劑1-Hydroxy-4-p-toluidinoanthraquinone質(zhì)量規(guī)格：AR

海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞(HA-h)(1×106)石蕊Litmus質(zhì)量規(guī)格：AR
Rosiglitazone  122320-73-4  中文名：羅格列酮  分子式：C18H19N3O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Ropivacaine mesylate  854056-07-8  中文名：甲磺酸羅哌卡因  分子式：C18H30N2O4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠肌球蛋白(MYS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Ropivacaine   98717-15-8  中文名：鹽酸羅哌卡因  分子式：C17H27ClN2O  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Roflumilast  162401-32-3  中文名：羅氟司特  分子式：C17H14Cl2F2N2O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Rizatriptan benzoate  145202-66-0  中文名：苯甲酸利扎曲坦  分子式：C22H25N5O2  度：98.0%      小馬鏈球菌獸疫亞種（ SEZ）PCR檢測試劑盒（熒光-PCR法）鼠血清(NO)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝