產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63918 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
牛巴氏桿菌(PB)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63918 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
小鼠上腺素(E)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Hydroxyprogesterone 68-96-2 中文名:羥孕酮 分子式:C21H30O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠上腺素 英文名稱: Mouse 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EPI Dabigatran etexilate 中文名: 分子式:C34H41N7O5
小鼠上皮中性粒細胞活化肽elisa試劑盒 小鼠上皮中性粒細胞活化肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠上皮中性粒細胞活化肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠上皮中性粒細胞活化肽試劑盒、小鼠上皮中性粒細胞活化肽elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Iloperidone 133454-47-4 中文名:伊潘立酮 分子式:C24H27FN2O4
小鼠上皮中性粒細胞活化肽-78(mouse ENA-78) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Diclofenac 15307-79-6 中文名:雙氯芬酸鈉 分子式:C14H10Cl2NNaO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ikshusterol 3-O-glucoside 112137-81-2 中文名: 分子式:C35H60O7
IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 細胞裂解液 (陽性對照) 脫氟阿托伐他汀鈉Defluoro Atorvastatin Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
小氣道上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL阿托伐他汀內(nèi)酯-d5Atorvastatin-d5 Lactone質(zhì)量規(guī)格:美國進口
Rb細胞,視網(wǎng)膜母細胞瘤 宛氏擬青霉 癌細胞;MDA-MB-4682-羥基-5-硝基煙酸(98%)2-Hydroxy-5-nitronicotinic acid質(zhì)量規(guī)格:0.98
ANGPT2 Protein Human 重組 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)三十六烷(standard for GC,≥98.0%(GC))Hexatriacontane質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,≥98.0%(GC)
Lec1(倉鼠卵巢細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 B7-H3 / CD276 細胞裂解液 (陽性對照) 三十六烷(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))Hexatriacontane質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC)
ST6GAL1 Others Human ST6GAL1 / SIAT1 細胞裂解液 (陽性對照) 羥基匹格列酮(M-Ⅱ)(非對映)Hydroxy Pioglitazone (M-II) (Mixture of Diastereomers)質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CSSTL1 中華鱉肺來源細胞羥基匹格列酮(M-Ⅳ)β-D-葡萄糖苷酸Hydroxy Pioglitazone (M-IV) β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
T-103B I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL羥基匹格列酮(M-Ⅶ)β-D-葡萄糖苷酸Hydroxy Pioglitazone (M-VII) β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
GC-1, 鼠精原細胞3-(L-4-氨基-2-羥基-丁酰)卡那霉素 A (丁胺卡那霉素雜質(zhì) A)3-(L-4-amino-2-hydroxy-butyryl)kanamycin A (Amikacin Impurity A)質(zhì)量規(guī)格:美國進口
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;KMYF 關(guān)節(jié)軟骨細胞完全培養(yǎng)基 100mL反式拉坦前列素trans Latanoprost質(zhì)量規(guī)格:美國進口
Pefloxacin mesylate 70458-95-6
中文名:甲磺酸培氟沙星 分子式:C18H24FN3O6S 度:98.0% 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISAKit ELISA.
96T/48T
Pazufloxacin mesilate 163680-77-1 中文名:甲磺酸帕珠沙星 分子式:C17H19FN2O7S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠緊張素 I (mouse ANG I) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 Phoenix
Pazopanib 444731-52-6 中文名:帕唑帕尼 分子式:C21H23N7O2S 度:98.0% 小鼠緊張素 II (mouse ANG II) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 Phoenix
Paroxetine 78246-49-8 中文名:鹽酸帕羅西汀 分子式:C19H21ClFNO3 度:99.0% mouse CD 40L ELISA Kit 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
Paris Saponin VII 68124-04-9 中文名:重樓皂苷VII 分子式:C51H82O21 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 大鼠 C 反應(yīng)蛋白 (rat CRP) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 ADI
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
牛巴氏桿菌(PB)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR