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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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HCT 116/Loap耐藥株現(xiàn)貨供應
  • 品牌:帛科
  • 產地:科研
  • 貨號:CE057
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-30
  • 更新日期: 2024-11-22
產品詳請
產地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 CE057
用途 公司產品僅用于科研
組織來源 上皮樣
細胞形態(tài) 貼壁
是否是腫瘤細胞
CAS編號
保質期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 Human
包裝規(guī)格
純度 %
是否進口

基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產品僅用于科研
中文名稱: HCT 116/Loap耐藥株現(xiàn)貨供應
簡稱:人奧沙利鉑耐藥細胞

種屬:Human

來源:上皮樣

培養(yǎng)基:RIPM1640+10%FBS+10ug/ml

狀態(tài):1:3 to 1:8

產品規(guī)格:貼壁

單位:

貨號:CE057

使用方法:
收到細胞HCT 116/Loap耐藥株現(xiàn)貨供應后,請按照以下方法進行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2.
待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3.
細胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。


實驗操作:
1
、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4
、除去內皮細胞:將縱向剪開, 內膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍,去掉內皮細胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8
、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9
、培養(yǎng)細胞密度:調整細胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1
)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1
)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

我妻氏培養(yǎng)基基礎shēng huà shì jì容量:RT,避光200毫升  聚糖對甲酰胺(2-AB)熒光標記試劑盒20

PH緩沖液 PH6.0(20)NA  ELISAKitHSP-70人熱休克蛋白70規(guī)格:48T/96T

L-天冬酸100  小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

基二茂鐵 Ferrocenylamine,96% 1273-82-1 100MG 通用試劑  Rat mammary carcinoma marker-ca153 -CA153ELISA 大鼠癌標志物-CA153ELISA試劑盒

輕化 litxium hydridq 7280-67-8  Humancalcitoningenerelatedpeptide,CGRPELISAKit 人降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
偏銻酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium antimonate,級別:CP98.5%,規(guī)格:100毫升  嗜酸性相關之RNA水解酵素家族成員2(EAR2)ELISA試劑盒 ,英文名: EAR2 ELISA Kit

5968-90-1黃苷XANTHOSINE DIHYDRATE  PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISA試劑盒豬生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

麗春紅BS,英文名或英文縮寫:Acid red 66,級別:AR98%,規(guī)格:100  Heneggphosvitinphosphopeptides,PPPELISA試劑盒雞蛋卵黃高1蛋酸肽(PPP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

3-苯基- 3-Phenyl-2-propen-1-ol (HPLC,98%) 4407-36-7 5MG 通用試劑  Humanai-IgAaibodyELISAKit人抗IgA抗體(ai-IgA-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

去輕抗壞血醋 Dqxy7nocSCORBIC cCID 490-83-2  人白細胞分化抗原40配體(CD40) ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
堿式乙酸鋁shēng huà shì jì容量:100  S100蛋白(S-100)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

10526-80-4烯醇酸單環(huán)己銨鹽(+4)Phosphoenolpyruvic acid cyclohexylammonium salt  兔子6-酮素F1α(6-keto-PGF1α)免疫試劑盒 Rabbit 6-keto-PGF1α ELISA Kit

葡聚糖T20shēng huà shì jì容量:保存:-20200u  去乙酰化酶Siuin-5(SI5/SIR2L5)ELISA試劑盒 ,英文名: SI5/SIR2L5 ELISA Kit

異丁香酚 Methyl isoeugenol,98% 93-16-3 25ML 通用試劑  RabbitApolipoproteinE,Apo-EELISA試劑盒兔載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

鄰本二加醋二異壬酯 Diisononyl phthclctq 8223-1-0  Humanai-filaggrinaibody,AFAELISA試劑盒人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HCT 116/Loap耐藥株現(xiàn)貨供應膽堿脂酶測試盒shēng huà shì jì容量:RT50/  L-乳酸脫氫酶(L-LDH)免疫試劑盒 Pig L-Lactate Dehydrogenase,L-LDH ELISA Kit

108-65-6丙二醇乙酸酯1-metxoxy-2-propyl acetate  禽病毒(ALV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

十六烷500毫克28  Humanpaxillin,PaxELISA試劑盒人樁蛋白(Pax)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

十八烷基基化銨 Trimethyloctadecylammonium chloride,... 112-03-8 1G 通用試劑  ELISAKitA豬抗凝血酶受體規(guī)格:48T/96T

異麥芽三糖 ISOMcLTOTRIOSq 3371-20-4  HumandysophinELISAKit人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T


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