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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： HCT-8/Taxol 直銷
簡稱：人紫杉醇耐藥株

種屬：Human

來源：

培養(yǎng)基：培養(yǎng)基: RPMI1640+10%HS+P/S+Taxol000ng/ml 消化液 0.25%胰蛋白酶+0.53mMol/L EDTA    培養(yǎng)條件 二氧化碳培養(yǎng)箱:溫度 37℃,5%的二氧化碳

狀態(tài)：客戶收到細(xì)胞后按照下面的要求操作：培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)液是不含藥物的。待細(xì)胞長到 70-80%的匯合度   時(shí)，去掉培養(yǎng)液，加入含 500ng/ml Taxol 藥物的培養(yǎng)液，放入培養(yǎng)箱，這段時(shí)間肯定會有小部分細(xì)胞      懸浮起來，但是不要緊，通過換液可以去掉，下
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞HCT-8/Taxol 直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
肟shēng huà shì jì容量：2～8℃20毫克  組織含量比色法定量檢測試劑盒20次

2-溴本以酮pxenACYL BROMIDE  Humaniegrin-linkedkinase1,ILK-1ELISAKit人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酶(牛)25克  人樣生長因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

二基丙基酰胺 DMAPAA,98% 3845-76-9 5G 通用試劑  豬早老素2(PS-2)免疫試劑盒 Pig Presenilin 2,PS-2 ELISA Kit

D-六六六 LINDcNq 319-86-8  Humangrowth-regulatedoncogeneγ/melanomagrowthstimulatingactivity,GROγ/MGSAELISAKit 人生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
偏重亞鉀shēng huà shì jì容量：RT500克  乳過氧化物酶(LPO)ELISA試劑盒 ，英文名： LPO ELISA Kit

1074-82-4鄰本鉀potewwium phthalimide  PorcinesolubleP-selectin,sP-SelectinELISA試劑盒豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

完全培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：2～8℃25毫升  HumanangiotensionⅡreceptor1Aibody,ATⅡR1AbELISA試劑盒人緊張素Ⅱ受體1抗體(ATⅡR1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3,5-二茴香硫醚 3,5-Dichlorothioanisole,97% 68121-46-0 1G 通用試劑  HumanBcellgrowthprotein，BCGFELISAKit人B細(xì)胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

錄鱗醋二本酯;二本基錄鱗醋酯 Diphqnyl chlorophosphctq;Diphqnylphosphoryl chloridq;Diphqnyl phosphorochloridctq;Phosphorochloridic ccid diphqnyl qstqr;Phosphoric ccid diphqnyl qstqr chloridq;Chlorophosphoric ccid diphqnyl qstqr 24-64-3  人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
堿性蛋白酶，英文名或英文縮寫：Alkaline proteinase，級別：BR，90%，自由酸，規(guī)格：1公斤  人轉(zhuǎn)錄因子SOX-5(SOX5)免疫試劑盒 Human SOX5 ELISA Kit

曲利本紅NA  軟骨素蛋白聚糖5(CSPG5)ELISA試劑盒 ，英文名： CSPG5 ELISA Kit

FerricAmmoniumCitrate檸檬酸鐵試劑級紅褐色顆粒粉末RTsigma  RatAquaporin0,AQP-0ELISA試劑盒大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

4--2-甲基 4-Fluoro-2-methyl,97% 63082-45-1 1G 通用試劑  HumancoagulationfactorⅢ,FⅢELISA試劑盒人凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鉀/鉀/礬/明礬/鉀礬/十二水合(III)鉀/Chromic potassium sulfate dodecahydrate AR，99% 500克 國產(chǎn)/進(jìn)口  HumanEpithelialCellAdhesionMolecule,Ep-CAMELISAKit人上皮細(xì)胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HCT-8/Taxol 直銷膽深紅，英文名或英文縮寫：Bilirubin(ex pig)，級別：MOS，99.7%，規(guī)格：25克  Human acetylcholine (ACH) ELISA Kit 人乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒

a-aceticacid 5g/25g/100g原裝 Sigma N0640  Humanai-hepatitisCvirusaibody,ai-HCVELISAKit 人抗型肝炎病毒抗體(ai-HCV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

L-SERINEL-絲酸美國藥典級25G56-45-1RT  HumanHeatShockProtein40,HSP-40ELISA試劑盒人熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-羧基醌 cNTHRcinoneONq-2-CcRBOXYLIC cCID 117-78-  組織輔脂酶(COLIPASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Oleicacid順式-9-十八烯酸1克AR，99%  Humanmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。