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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： HeLa /DDP（HeLa /DDP）價(jià)格
簡(jiǎn)稱：人細(xì)胞/DDP

種屬：Human

來(lái)源：

培養(yǎng)基：   培養(yǎng)條件溫度：37℃氣相：95%空氣，5%二氧化碳產(chǎn)品使用說(shuō)明：僅供科研研究使用

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：CE048
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞HeLa /DDP（HeLa /DDP）價(jià)格后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
鎢酸鉀500克  人黏著斑激酶(FAK)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

SuperscriptII 2000u/10000u Invitrogen原裝  小鼠脫氧膠原交聯(lián)(DPD)免疫試劑盒 Mouse deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit

氫氧化鋇shēng huà shì jì容量：RT5克  轉(zhuǎn)基因植物NOS基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

隊(duì)肖基本醇 4-nitnobqnzyl clcohol 619-73-8  HumanSolubleClusterofdiffereiation38,sCD38ELISA試劑盒人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

葡聚糖T1000shēng huà shì jì容量：2000u  小鼠胃標(biāo)志物CA199ELISAKit小鼠胃標(biāo)志物CA199ELISAKit，48T/96T小鼠胃標(biāo)志物CA199ELISAKit，48T/96T規(guī)格：48T/96T
葡聚糖T2000shēng huà shì jì容量：保存：-20℃500u  人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

CollagenI 100mg Gibco分裝  小鼠己糖激酶(HK)免疫試劑盒 Mouse Hexokinase,HK ELISA Kit

2′-脫氧腺苷-5′-單嶙酸25克RT  異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hNP A1)ELISA試劑盒 ，英文名： hNP A1 ELISA Kit

四氧嘧啶四水(+4℃) clloxcn 20-71-2  Mouseadrenomedullin,ADMELISA試劑盒小鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

胞苷-5’-三鱗醋二內(nèi)鹽 Cytidinq-5'-triphosphctq diwo7ium sclt dihydrctq 8101-87-2  ELISAKitFASL小鼠凋亡相關(guān)因子配體規(guī)格：48T/96T
堿性碳酸shēng huà shì jì容量：RT5克  小鼠葉酸(FA)免疫試劑盒 Mouse Folic acid,FA ELISA Kit

94790-37-1本并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲六扶酯 (HBTU)(2-8℃)2-(1H-Benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetrametxyluronium hexafluorophosphate  病毒Ⅱ型(DFV-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

硅膠板GF25410毫克保存：-20℃  HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISA試劑盒人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十九酸 Nonadecanoic acid,≥98% 646-30-0 1G 通用試劑  ELISAKitFree-T3小鼠游離三甲狀腺原氨酸規(guī)格：48T/96T

L-三梨糖 L-(-)-SORBOSq 87-79-6  HumanColonCancerAigen，CCAELISAKit人抗原(CCA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
HeLa /DDP（HeLa /DDP）價(jià)格蛋白胨shēng huà shì jì容量：25克  Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

13464-82-9銦 無(wú)水Indium sulfate  HumanCathepsinAibodies,CathAbELISAKit人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

焦嶙酸鈣shēng huà shì jì容量：RT1克  人EB病毒IgG(EBv IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(2-乙基)醚 Vinyl(2-chloroethyl),98% 110-75-8 25G 通用試劑  兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒 Rabbit angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit

/四氫硼鉀//鉀氫化硼/Potassium borohydride CP，95%，及 50克 國(guó)產(chǎn)  羥基膠原交聯(lián)(OH-PYD)ELISA試劑盒 ，英文名： OH-PYD ELISA Kit
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。