產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P63946 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
牛流行熱病毒(BEFV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63946 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISAKit ELISA. 96T/48T Levodopa 中文名:左旋多巴 分子式:C9H11NO4
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體elisa試劑盒 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體試劑盒、小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Lenalidomide 中文名:來那度胺 分子式:C13H13N3O3 度:98.0%
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Levamisole 16595-80-5 中文名:鹽酸左旋咪唑 分子式:C11H13ClN2S
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tetraethyl ranelate 中文名: 分子式:C20H26N2O8S
小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Leflunomide 中文名:來氟米特 分子式:C12H9F3N2O2 度:98.0%
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY0903 新生兒細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLC12E10,10%溶液質(zhì)量規(guī)格:BRC12E10
成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-acfC12E9, 10%溶液質(zhì)量規(guī)格:BRC12E9
Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 溴-6氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMagenta-Gal
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株;DMF7檸檬酸鎂九水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRMagnesium nonahydrate
大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1) 細(xì)胞,SHG-44細(xì)胞 W6/32細(xì)胞,小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞十二烷基硫酸鎂(分子生物學(xué))質(zhì)量規(guī)格:>85%,分子生物學(xué)級Magnesium dodecyl sulfate
TNFRSF14 Others Human TNFRSF14 / HVEA / HVEM 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 麗春紅2R(BS)Ponceau
2R質(zhì)量規(guī)格:BS
腎小球內(nèi)皮細(xì)胞HRGEC孟加拉玫瑰紅,酸性紅94Rose bengal質(zhì)量規(guī)格:AR
HA Others H10N9 甲型 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 偶氮熒光桃紅,酸性紅1Azophloxine質(zhì)量規(guī)格:BS
大鼠小腸內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL曙紅Y,醇溶劑紅 43Eosin Y ,alcohol solution質(zhì)量規(guī)格:AR
RajiButt's瘤細(xì)胞 Raji human
Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS曙紅BEosin B質(zhì)量規(guī)格:BS
Spongouridine
3083-77-0 中文名:阿苷 分子式:C9H12N2O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠溶菌酶試劑盒elisa試劑盒 小鼠溶菌酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠溶菌酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠溶菌酶試劑盒、小鼠溶菌酶試劑盒elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Soyacerebroside II 115074-93-6 中文名:大豆腦苷II 分子式:C40H75NO9 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠尿激酶elisa試劑盒 小鼠尿激酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠尿激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠尿激酶試劑盒、小鼠尿激酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Soyacerebroside I 114297-20-0 中文名: 分子式:C40H75NO9 度:95.0% 關(guān)鍵詞: ; 番杏; 大豆; 大蒜; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠活化素elisa試劑盒 小鼠活化素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠活化素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠活化素試劑盒、小鼠活化素elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Sorafenib tosylate 475207-59-1 中文名:索拉非尼 分子式:C28H24ClF3N4O6S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Sorafenib 284461-73-0 中文名:索拉非尼 分子式:C21H16ClF3N4O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠還原型谷胱甘肽(GSH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
牛流行熱病毒(BEFV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR