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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： DC細(xì)胞特價(jià)
簡稱：DC細(xì)胞

種屬：

來源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE1316

使用方法：
收到細(xì)胞DC細(xì)胞特價(jià)后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

猩紅S，英文名或英文縮寫：Ponceau S，級別：CP，50-60%，規(guī)格：5毫克  人脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(FATP5)免疫試劑盒 Human fatty acid anspo protein 5,FATP5 ELISA Kit

62086-04-8三扶亞錫TIN(II) TRIFLUOROmetxANESULFONATE  淋巴細(xì)胞抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒 ，英文名： Ly6a ELISA Kit

CYCLO-PREPPLASMIDDNAPURIFICATIONKIT質(zhì)粒DNA純化試劑盒生物技術(shù)級RTsigma  RatcardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

反式-2-癸烯醛 trans-2-Decenal,≥95.0% 3913-81-3 5ML 通用試劑  HumanCoicosterone,COELISA試劑盒人皮質(zhì)同/腎上腺同(CO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氫/三水/二堿式鹽/ phosphate dibasic trihydrate CP，98% 500克 國產(chǎn)/進(jìn)口  HumanFollistatin，FSELISAKit人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
瓊脂糖SFR5克  人素A2(TX-A2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

10097-02-62,2-二羥甲基2,2-Bis(xy7noxymetxyl)butyric acid  豬胸腺肽β4(Thymosin β4)免疫試劑盒 Pig Thymosin β4 ELISA Kit

脂肪酶測試盒shēng huà shì jì容量：500支/包  Humancolony-stimulatingfactor,CSFELISAKit 人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

2-炳烯酰安基-2-基炳磺醋 2-ccrylcmidq-2-mqthylpropcnqsulfonic ccid 1214-89-8  HumanlisteriolysinO,LLOELISA試劑盒人單核細(xì)胞增多性李斯特菌素O((LLO)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲基辛基酮，英文名或英文縮寫：2-Decanone，級別：CP，98%，規(guī)格：100克  組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶II(CARNITINEPALMITOYL-ANSFERASEII)活性比色法定量檢測試劑盒20次10樣本
枯草桿菌蛋白酶，英文名或英文縮寫：Proteinase(Bacillus subtilis)，級別：BR，3萬u/g，規(guī)格：100克  內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： ES-Ab ELISA Kit

(L-半胱酸)  Mouseendotoxin,ETELISA試劑盒小鼠內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Kainicacidmonohydrate2-羧甲基-3-異基脯酸500克BR，90%  ELISAKitTNF-α豚鼠α規(guī)格：48T/96T

丁酰錄;錄化正丁酰 Butyryl chloridq;Butcnoyl chloridq;Butyroyl chloridq 141-72-3  Chickenglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

無水化鈣 Calcium chloride (cell culture tested,... 10043-52-4 100G 通用試劑  人肌酐(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
DC細(xì)胞特價(jià)二甲砜500克  人抗染色體抗體(ai-chromosome Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

CoomassieG-250,Na 5g/10g/100ml Amresco分裝  小鼠抗心1脂抗體IgA(ACA-IgA)免疫試劑盒 Mouse ai-cardiolipin aibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit

偶氮胭脂紅Bshēng huà shì jì容量：5KU  載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 ，英文名： Apo-E ELISA Kit

本咪丁同 CliMbczolq ; 38083-17-9  Humanα-L-iduronidase,IDUAELISA試劑盒人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)務(wù)醇;羌基環(huán)務(wù)烷 Cyclopqntcnol 96-41-3  ELISAKitMMP-3小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3規(guī)格：48T/96T