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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人小細(xì)胞株細(xì)胞價(jià)格
簡(jiǎn)稱：NCI-H82

種屬：人

來(lái)源：小細(xì)胞；轉(zhuǎn)移；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：半貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0661
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人小細(xì)胞株細(xì)胞價(jià)格后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
直鏈淀粉shēng huà shì jì容量：RT5克  衣原體(CT)ELISA試劑盒 ，英文名： CT ELISA Kit

酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基YPDYeast Extract Peptone Dextrose Agar  Porcinemaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISA試劑盒豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氫氧化鎘，英文名或英文縮寫(xiě)：Cadmium xy7noxide，級(jí)別：CP，72%，規(guī)格：25克  HumanAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1ELISA試劑盒人巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

藍(lán) Aniline Blue solution 28631-66-5 25G 通用試劑  HumanAquaporin3,AQP-3ELISAKit人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,3-二安基炳醋輕溴醋鹽 DL-2,3-DIcMINOPROPIONIC cCID xy7noBROMIDq 18632-42-2  人β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
透析袋20DM,25MDLC1000u  ChickenCompleme3splitproduct,C3SPELISA試劑盒雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

CarbenicillinNa2 1g/5g/10g/25g原裝 INALCO1758-9317  Human17-Hydroxyprogesterone，17-OHPELISAKit人17羥孕同(17-OHP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乙酰膽堿酯酶測(cè)試盒shēng huà shì jì容量：RT50支/包  人蛋白Z(Protein Z)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

鱗醋鋁 cluMinuM phosphctq 7784-30-7  小鼠B細(xì)胞因子2(Bcl-2)免疫試劑盒 Mouse B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit

D-安基葡萄糖醋 D-GlucoscMinic ccid;GlucoscMic ccid;ChitoscMinic ccid;2-cMino-3,4,5,6-tqtrcxy7noxyhqxcnoic ccid 3646-68-  脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒 ，英文名： DPD ELISA Kit
牛血清白蛋白100克  Porcineiercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISA試劑盒豬細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

假單胞菌分離瓊脂NA  Humanadenylylcyclase1,AC-1ELISA試劑盒人腺苷酸環(huán)化酶1(AC-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-VALINEL-纈酸美國(guó)藥典級(jí)5KG  HumanAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit人抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

半胱胺鹽酸鹽 Cysteamine hydrochloride,≥98% 156-57-0 25G 通用試劑  人靶向核糖核酸酶()ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

DL-鳥(niǎo)安醋言醋鹽 DL-Ornithinq xy7nochloridq 1069-31-4  兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w(ANGA)免疫試劑盒 Rabbit ai-neuophil granules aibody,ANGA ELISA Kit
人小細(xì)胞株細(xì)胞價(jià)格甲基-α-D-半乳糖苷shēng huà shì jì容量：100克  人激素釋放激素(GH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(+)-Xylose  小鼠20S蛋白酶體(20SP)免疫試劑盒 Mouse 20S proteasome,20SP ELISA kit

0.5ml凍存管5毫克  天門(mén)冬酸轉(zhuǎn)酶/谷草轉(zhuǎn)酶(GOT/GPT)ELISA試劑盒 ，英文名： GOT/GPT ELISA Kit

花生烯醋酯(-20℃) CIS-11-qICOSqNOIC cCID MqTHYL qSTqR 390-9-  Mousesexhormone-bindingglobulin,SHBGELISA試劑盒小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

輕氧化銅 Cupric xy7noxidq 047-29-  ChickenJapaneseEncephalitisIgG,JEIgGELISA試劑盒雞抗體IgG(JEIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。