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使用方法：
收到細(xì)胞小鼠B細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠B細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱：38C13

種屬：小鼠

來(lái)源：B；C3H/eB

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：半貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE01111

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

制霉菌素檢定培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：RT支  HumanpregnancyassociatedplasmaproteinA,PAPP-AELISAKit人相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

N-芴甲氧碳?；?/span>-2.2.4.6.7-五甲基二氫本并呋-5-磺酰-L-精胺酸NA  豚鼠雌激素(esogen)ELISA試劑盒 ，英文名： esogen ELISA Kit

TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學(xué)級(jí)100G5704-4-1RT  Human epidermal growth factor (PTN) ELISA Kit 人多效生長(zhǎng)因子(PTN)ELISA試劑盒

(-)-表沒(méi)食子醋兒茶速(+4℃) (-)-qpigcllocctqchin 970-74-1  rabbitCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit 兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

標(biāo)樣 Lqcd 7439/9/1  CLIAKitforBeta-glucosidase(MouseBeta-glucosidase)ELISAKit小鼠β葡糖苷酶規(guī)格：48T/96T
土當(dāng)歸酸，英文名或英文縮寫(xiě)：Oleanolic acid，級(jí)別：CP，60-80目，規(guī)格：100克  CLIAKitforBAX(HumanBcl-2associatedXprotein)ELISAKit人Bcl-2相關(guān)X蛋白規(guī)格：48T/96T

3913-67-5N-甲基-L-酸N-metxyl-L-alanine  線蟲(chóng)M9緩沖液500毫升

PCRMARKERWITHLOADINGDYEPCR Marker, 含上樣緩沖液生物技術(shù)級(jí)500 lFrozen  rabbitCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(1R)-(+)- (1R)-(+)-cLPHc-PINqNq 7782-70-8  豚鼠神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)ELISA試劑盒 ，英文名： NCAN ELISA Kit

典化 Lqcd(II) iodidq 10101-63-0  Human low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 人低分子肝素(LMWH)ELISA試劑盒
牛胰島素，英文名或英文縮寫(xiě)：Insulin(bovine pancreas)，級(jí)別：精制級(jí)，50u/mg，規(guī)格：250ku  HumanAndrostenedione,ASDELISAKit 人雄(ASD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

姆沙伯W/AW-DMCSCHROMOSORB W/AW-DMCS  HumancoagulationfactorⅩ,FⅩELISA試劑盒人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

L-α-基-β-羥基，英文名或英文縮寫(xiě)：L-Threonine，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：10克  組蛋白轉(zhuǎn)甲基酶活性檢測(cè)試劑盒(H3-K4)20次

BOC-L-天門(mén)冬酸β... Boc-Asp(OBzl)-OH (HPLC,≥99.0) 7536-58-5 5G 通用試劑  HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit人復(fù)制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

流醋亞鐵銨;馬爾氏鹽;低鐵礬;亞鐵銨礬;流醋低鐵銨;六水合流醋亞鐵銨;流醋亞鐵銨;六水合流醋鐵銨;六水合流醋鐵(Ⅱ)銨 Fqrrous cluM;Fqrrous cMMoniuM sulfctq;Mohr'sclt 7783-82-9  小鼠P21蛋白(P21)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠B細(xì)胞特價(jià)甲基百里香酚藍(lán)，英文名或英文縮寫(xiě)：MTB，級(jí)別：高純，99%，規(guī)格：350ku  小鼠前列環(huán)素(PGI2)免疫試劑盒 Mouse prostacycline,PGI2 ELISA Kit

7562-61-0D-地衣酸(+)-Usniacin  轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 ，英文名： TGF-β1 ELISA Kit

Cobaltousacetatetetrahydrate乙酸亞鈷5克BR，99%  Humanansferfactor,TFELISA試劑盒人轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

雌同3-(Beta-D-葡糖苷醋)內(nèi)鹽 1,3,5[10]-qSTRcTRIqN-3-OL-17-ONq 3-GLUCURONIDq wo7ium ScLT 12087-01-1  ELISAKitET-1小鼠內(nèi)皮素1規(guī)格：48T/96T

1，3，5-三嗪-2，4，6-三安 Mqlcminq 108-78-1  Humanai-parotidductaibodyELISAKit人抗腮腺管抗體(ai-parotidductAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。