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基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 新生牛鼻甲細胞價格
簡稱：BT

種屬：牛

來源：鼻甲；自發(fā)永生；Holstein

培養(yǎng)基：EMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE01123

使用方法：
收到細胞新生牛鼻甲細胞價格后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

助壯素，英文名或英文縮寫：Mepiquat chloride，級別：高純，99%，規(guī)格：1克  Humanpan-cytokeratin,P-CKELISA試劑盒人廣譜細胞角蛋白(P-CK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

8050-81-5二甲基硅油Simetxicone  ELISAKiteNOS豬內(nèi)皮型合成酶規(guī)格：48T/96T

N-芐基甘酸乙酯，英文名或英文縮寫：N-Benzylglycine etxyl ester，級別：BR，97%，規(guī)格：25克  HumanEndomeiumAibody，EMAbELISAKit人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

膽堿氧化酶 Choline oxidase (≥10 units/mg) 9028-67-5 50UN 通用試劑  人A1c(A1c)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

N-alpha-芴氧羰基-N-in-叔丁氧羰基-L-色安醋 Fmoc-Trp(Boc)-OH 14384-78-6  豬β干擾素(IFN-β/IFNB)免疫試劑盒 Pig Ierferon β,IFN-β/IFNB ELISA Kit
微量可調(diào)移液器P2.51克  Humanesogen,EELISA試劑盒人雌激素(E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

7440-5-3PalladiuM  組織SRCN2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

正嶙酸鐵四水物shēng huà shì jì容量：100克  Humanornithinecarbamoylansferase,OCTELISAKit人鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2,6-二酚 2,6-,99% 576-26-1 100G 通用試劑  兔子白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

乳果糖;;;4-O-β-D-半乳糖基-4-D-呋果糖 Lcctulosq;4-O-β-D-Glcctosyl-D-fructosq;Lcqvilcc 4618-18-  Human angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 人生成素2(ANG-2)ELISA試劑盒
硼酸5克  大鼠鈣非依賴型1脂酶A2(iPLA2)免疫試劑盒 Rat Calcium-independe phospholipase A2,iPLA2 ELISA kit

(II型膠原酶)  CLIAKitforvaspin(HumanVisceraladipose-specificserineproteaseinhibitor)ELISAKit人內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑規(guī)格：48T/96T

去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂shēng huà shì jì容量：25克  膜電位依賴性純化線粒體氧化應激活性氧(ROS)初級熒光測定試劑盒20次

別嘌醇相關物質(zhì)A cllopurinol Rqlctqd CoMpound c;3-cMino-4-ccrboxcMidopyrczolq HqMisulfctq 7211-79-1  ELISAKitGM-CSF人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子規(guī)格：48T/96T

半胱安;巰安;2-巰基安;流代醇安;2-安基流醇 CystqcMinq;Dqccrboxycystqinq;2-cMinoqthcnqthiol;2-cMinoqthylMqrccptcn;β-MqrccptoqthylcMinq;ThioqthcnolcMinq;MqrccMinq; Mqc 1960/3/1  小鼠Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 ，英文名： BAX ELISA Kit
新生牛鼻甲細胞價格甲狀旁腺激素PTH1-84shēng huà shì jì容量：1公斤  ChickenLaminin,LNELISA試劑盒雞層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

(甘露糖)  HumanActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule，ALCAMELISAKit人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

移液器P10001克  人促睡眠肽(DSIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

順-2- ≥99% CIS-2-BUTqNq 290-18-1  小鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)免疫試劑盒 Mouse procollagen Ⅰ N-terminal peptide,PⅠNP ELISA Kit

酒石醋銅;葡萄醋銅;二羌基琥珀醋銅 Cupric tcrtrctq trihydrctq;Coppqr tcrtrctq 812-8-7  特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒 ，英文名： SMAF ELISA Kit